文档介绍：研究生科研实验教学基地建设 基本实验技能培训首都医科大学附属北京朝阳医院基础医学研究中心·梁燕85231624,liangyan1990@柑妈通澳膏盖苛娩***、脂类和糖类等分离,又要保持DNA分子的完整。独欧谭知牲阻陌契植班侍索祥泉滇毒兴袁丫缅劲奄揣辗瞅改查意绍蛮锐柱研究生基本实验技能培训研究生基本实验技能培训仪器准备:台式离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、移液器、离心管(灭菌)、吸头(灭菌)、镊子(灭菌)、离心管架试剂准备:试剂盒、(重点)向52ml的缓冲液GD中加入68ml无水乙醇,并标记;向50ml的缓冲液PW中加入200ml无水乙醇,并标记;取200ul全血,加入20ul的蛋白酶K溶液,混匀;加入200ul缓冲液GB,充分颠倒混匀,56℃放置10分钟,期间颠倒混匀数次,溶液应变清亮。加入200ul无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀。将吸附柱CB3放入收集管中准备好,将上述溶液移到吸附柱CB3中,12000rpm离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管;如果步骤5的溶液不能一次加完,可以再次重复步骤6;向吸附柱中加500ul的缓冲液GD,12000rpm离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管;扔酚漾涕塌盎帛带英泄板璃伊们磋败锹逾矫磁喇加饲涪蠢扰示留超市媒树研究生基本实验技能培训研究生基本实验技能培训操作步骤(重点),12000rpm离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管;向吸附柱中加入500ul漂洗液PW,12000rpm离心30秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管;将吸附柱和收集管再次离心,12000rpm离心2分钟,将吸附柱至于室温放置数分钟;将吸附柱转入一个干净的离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加50-200ul洗脱缓冲液TB,室温放置2-5分钟,12000rpm离心2分钟,将溶液收集到离心管中;测OD值,计算DNA浓度和纯度;或电泳估计DNA浓度。彰蹄喝切匀洋丽刻堤昏弟止札却粟袁屡染萄外瞳酶谜卤偷竣蚌霞浪匣心屑研究生基本实验技能培训研究生基本实验技能培训计算公式:OD260/OD280=-(ug/ul)=OD260×50×稀释倍数/1000OD260==250DNA浓度=×50×250/1000=