文档介绍：郑州大学
硕士学位论文
临床分离志贺菌属细菌多重耐药机制的研究
姓名:杨海燕
申请学位级别:硕士
专业:流行病与卫生统计学
指导教师:段广才
临床分离志贺菌属细菌多重耐药机制的研究中文摘要研究生杨海燕师段广才郑州大学公共卫生学院流行病学教研室郑州导志贺菌属细菌又称痢疾杆菌,它是引起细菌性痢疾的主要病原。本病是全球流行的传染病,尤其在卫生条件相对落后的,是我国夏秋季常见的肠道传染病。菌痢自广泛应用抗菌药物治疗以来,志贺菌不断产生耐药株,并呈多重耐药,不仅耐药率高,且耐药产生快及广泛,给本病的防治带来很大困难,从而造成本病蔓延及流行。年痢疾志贺菌被药机制,克服细菌多重耐药是提高菌痢防治水平的重要课题。大肠杆菌研究发药机制称之为主动流出机制,该机制是由染色体介导的在一个调节位点控制下的多基因协作表型,即导致细菌多重耐药泵蛋白表达增加,该泵系统可将结构不同的药物泵出细胞膜外,致胞内药物浓度达不到有效浓度,从而使细菌产生多重耐属细菌的多重耐药机制及探索解决其问题的途径,本研究对临床收集的志贺菌进尽管在菌痢的防治工作中已取得了重大成就,但由于人口众多,经济不发达,且志贺菌菌型复杂,易变迁,各菌型间无交叉免疫等原因,菌痢发病率一直处于较隙ㄎD鸵┬匀战ピ龀じ死啻淳薮笸驳南妇Q芯恐竞鼐舻亩嘀啬现:甌嘀啬鸵┍孟低吃诖蟪Ω司嘀啬鸵┕讨衅鸬街匾W饔茫淠药。已有的研究发现,类似的多重耐药泵在肠道杆菌中广泛存在。为了解志贺菌郑州大学硕士学位论文
方法结果行┰霰嗟径噘缒鸵┍玫霸汪浣峁够羇⒃擞肞约酵变性进行检测、印迹检测其表达情况,并在实验室研究泵蛋白抑制剂琹对惑贺藏的作用。嘀啬鸵┲旰兔舾幸吧甑纳秆。翰捎们碇∈头ú舛ǹ咕┪锒灾竞鼐懿最低橛ㄅǘ琈\彩笛槭野晟;匪亍氯霉索、氮苄青霉素、毗哌酸或环丙沙墼的菌株为多重耐药株琈舾械木晡C舾幸吧竞鼐荞蛄交废∩驸稻不郏河τ糜ü夥ú舛ㄖ竞鼐赴诨繁侈降积聚。积粱试验均于水浴中进行,。悫贺蔻缨腹内嚣嚣沙星浓度炎时每舞萤液维艟蠢掰含的环丙沙星毫克数表示。6嘀啬鸵┍孟低砤—基因的单链构象多态。眭分幸厅:扩增莲篱,扩增产貔经限制性内仞酶化湫院缶行跃郾0纺旱缬荆莸チ创亢臀恢门卸嫌泄饣捎盟碜R锓ū昙翘角ィ航ù昙堑腄探针片段变性后与随机引物杂交,然后以此杂交的寡核待酸为引物,在酆限禝大片段的催化下,合成与搽针グ麴螪链,爱应液串含有,都形成遗高睾标记韵迹:提取缨飓总关【┍洹w衲旱缬荆誖转移至尼龙膜,在含有探针的杂交液中杂交,应用地离辛检测试剂盒检测杂交结果,根据杂交条带密度半定量细胞中表达水平。消化幌突变。探针。,甆疞甇郑州大学磺士学位论文临床分离意凝毽属细麓多燕耐嚣规利豹磺究
素、氯霉素、氨苄青霉素、吡哌酸或环丙沙星挚股氐囊┟羰匝榻峁秆多重耐药株的倍,为多重耐药株的倍,差异有显著性。加入能量抑制剂后,多重耐药株细胞内环丙沙星稳态浓度上升了倍,多重耐药株上升了倍,敏感野生株上升了倍,各组之间比较差异有显著性。曛竞鼐舳嘀啬鸵┲旰株敏感野生株及标准株全部分别扩增出嘀啬鸵┍孟低砤虻牡チ垂瓜蠖嗵J治觯憾株临床分离志贺菌属细菌研究,发现甓嘀啬鸵┲,突变率为%:未发现基因突变婊锓ū昙翘秸耄核婊锓ū昙堑奶秸肱ǘ确直鹪嘉#嘀啬鸵┍:多重耐药株、┲闙基因表达水平略高于敏感野生株,但统计学比较差异无显著性,嘀啬鸵┲旰兔舾幸吧甑纳秆。焊萘俅采戏掷氲株志贺菌对四环出株多重耐药株,昝舾幸吧辍竞鼐赴诨繁承堑幕郏好舾幸吧晗赴诨繁承俏忍ǘ仍嘉长度的片段,分别是、和基因的扩增产物,未发现多重耐药泵基因缺失株。/肛/.蛅憾嘀啬鸵┲闙懊舾幸吧昶鋞虮泶锼骄臣蒲П较差异无显著性,琍.。嘀啬鸵┍靡种萍罬,对志贺菌的抑制作用结果分析:在多重耐药泵基因高表达的一些菌株中作用明显,该抑制剂可通过抑制多重耐药泵从而使和株。基因为临床分离志贺菌属细菌多重耐药机制的研究、/。郑州大学硕士学位论文
关犍键结论米嵴榉掷腠ê剌鍪粲в┙唬⑽拣多霆辩药拣基因突变,总突霹逶逶蘩裁多重霹蕊象麸蔼使嚣嚣沙星对惠贺蓥稳对敏感。环丙沙墓霹恚贺蓄辍封敏感,麓在舅~些菌拣孛无鞠显终溪。狙芯糠⑾至俅卜掷胫竞鼐舳嘞鸵┲甓曰繁承堑闹鞫馀殴δ芟越锤哂敏感鹭奎拣。在燕入裁量摔稍裁露,多重瓣药撩秘皱惑野生稼对环嚣渗星鲶辍聚至海一农平。缨菡酎喹诺黼类药物程度越强,其主动外爿Α臁煸角俊狙芯渴状卧谥竞鼐粝妇欣┰龀龆嘀啬鸵┍没騛.,,总突变率为%。未发现基戮突变株。玖壮璺⑾侄嘀啬洼钕逑低砤蛟隰幻露嘀啬鸵┲眷圉素酶弑碚猓翊沃实鹄级鞒龌圃诹俅捕嘀啬鸵┲驹蘧写嬖凇嘣四鸵┍靡