文档介绍：中国医科大学研究生学位论文独创性声明Y2092101本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。论文作者签名:——日期:中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外),以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名:垒兰:璺指导教师签名:至垡聋日期:丛!塾!!堂目录一、摘要中文论著摘要??????????????????????????..1英文论著摘要??????????????????????????..4二、英文缩略语???????????????????????????..9三、论文刖茜???????????????????????????????????????一10材料与方法???????????????????????????ll实验结果????????????????????????????19讨论???????????????????????????????????????一26结论???????????????????????????????????????..27四、本研究创新性的自我评价?????????????????????28五、参考文献????????????????????????????29六、附录综述???????????????????????????????????????”33在学期间科研成绩????????????????????????46致{射???????????????????????????????????????..47个人简介????????????????????????????48·中文论著摘要·白藜芦醇联合蛋白酶体抑制剂对白血病的治疗作用及其机制研究目的白血病是一种造血系统的恶性病变,其主要表现为异常的白血病细胞及其幼稚细胞在骨髓及其他造血组织中进行性的异常增生,发病机制目前尚不完全明确。(UPS)是真核生物体内进行蛋白选择性降解的主要通路。由UPS介导的蛋白质降解通路的严密调控在细胞周期中蛋白质半衰期的调控、转录调控、抗原提呈、血管发生、以及移除错误折叠或受损的蛋白质等过程中均发挥重要作用。研究表明,蛋白酶体抑制剂通过对泛素化通路的阻断可诱导多种包括白血病的人类肿瘤的细胞凋亡,是一类很有发展前途的抗肿瘤药物。由于人工合成的化疗药物在治疗肿瘤方面存在局限性,近年来一些从植物中提取的天然抗肿瘤药物得到了科研界、医疗界的广泛关注。白藜芦醇是富含于葡萄皮、花生、红酒等中的一种天然多酚类化合物,白藜芦醇在抗肿瘤、抗炎、肝脏保护、神经保护、心血管保护和免疫调节等方面均发挥重要作用。已有大量报道表明,单独应用大剂量(通常大于50pmol/L)的白藜芦醇能够抑制人类肿瘤细胞的生长。另外已有报道,白藜芦醇联合某些化疗药物治疗肿瘤,不仅能够降低化疗药物的毒副作用,而且能够增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。本研究探讨蛋白酶体抑制剂单独及联合白藜芦醇在白血病细胞凋亡过程中的影响作用。方法1、单独使用MGl32或联合白藜芦醇处理白血病细胞2、MTT法检测细胞活力3、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期4、蛋白印迹法检测蛋白PARP剪切水平5、实时定量PCR和蛋白印迹法检测p27Ⅺp1和FOX01的表达水平6、染色质免疫沉淀法检测结合到p27硒p1启动子的FOX01水平结果一、白藜芦醇能够对抗MGl32对I(,而大于501上mol/L能使细胞活力明显下降;K562细胞活力对MGl32呈剂量依赖性下降;白藜芦醇能够对抗MGl32呈剂量依赖性诱导的细胞活力变化,21unol/L具有明显的抑制效应,5-201xmol/L显示出最大效应;即使选用毒性剂量()的自藜芦醇仍然能够有效对抗MGl32的细胞毒性。AnnexinV/PI双染证实MGl32能够明显诱导K562细胞凋亡,1009mol/LI刍藜芦醇单