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人胚脑组织神经干细胞的分离培养与鉴定.pdf

文档介绍

文档介绍:郑州大学
硕士学位论文
人胚脑组织神经干细胞的分离培养与鉴定
姓名:赵新利
申请学位级别:硕士
专业:神经外科
指导教师:杨波;宋来君
20030602
人胚脑组织神经干细胞的分离培养与鉴定郑州大学第一附属医院神经外科郑州研究生导师杨波宋来君杜英赵新要摘未被揭示。!⑿切未闹首喉∫粕偻唤捍取的发现和深入研究可能为治疗神经系统疾病带来新的契机。但是,在中枢神经系统中,发育阶段不同、部位不同,所占的比例不同,且普遍比例较低。自被发现戳柬,建立体终培养体系,用不同的因素刺激快速缮蓬,获欷大量的,罨找影响分化的不同因索,提高神经元在分化中所占的比例,燃国内外许多学者一直研究的方向和目标。白血病抑制因子是一种多功能静糖蛋白,其分子量为,含有霭被岵谢芄挥盏季尴赴姆只⒁⋯起在造皿千细胞显缙诘骺刂芯哂兄匾哄觥I窬谟t怯さ闹匾W槌沙煞郑谥惺嗌窬低持泻较高。神经节营脂与多肽生长因子一样,被认为是与神经细胞发育、分化、存活及病理的所有阶段相关联的营养单位。由于它们调控过程复杂,它们在许多方面的生理角色尚动物神经节符脂的主要种类,外源性能够通过衄脑屏障,嵌入损伤的神经细胞膜,具有明显的抗神经细胞损伤、促修复和促神经细胞生长的作用。眨年来,国内外有关靛瑟究,多数停聱在鬣魏,霹久躯研究相对较少,訬鲋琋是一种终生具有自我更新能力的细胞,可增殖制鼠骨髓瘤细胞的增殖篒一、狢郑州大学描颤士研究生毕业论文入珏脑组织神经千细胞酌分离培养与鉴定
、五缍来源戆在秘同豹条陆杏盏挤执炕駺辩藏一培养来源和分化的影响,国终学者做了一些研究工作,丽国内文献报道较少,—耆伺咧惺神经系统的作用更为鲜见。本实验,机械分离周人胜脑室区/脑室下区,/鼢维织,蹋无血清培养毯髯樘砑映煞植同訬信嗳冉喜煌囿晏跫孪赴で榭觯辉谙嗝榛虿煌鮷牛下诱导细胞分化,比较分化后神经元及神经胶质细胞所占比例;探讨了机械分离法对培养的适壤性和訬ず头只挠跋臁S猛靡呦赴Хㄋ蟛馀嘌胞的神经上皮于纲臌爱自洲方法:取材于周人胚/橹褂没捣掷敕ǚ稚⒛韵赴椿∨嘌基疐刑砑映煞值牟煌治遄椋篈组加入痬,榧尤每组两瓶,鬣入嘌,信嘌"僮訟组、椤组中分裂敬少量缨鼹悬滚,殇调裁成缨藏密度走痬玉蛴梵捩軱培养蔽,每缝孔,每孔,置入ぱ渑嘌S谂嘌肕比色法检测各组值,了解訬鲋车挠跋臁"圩訠组、椤组中分别取少量细胞悬液,另蘧麴含基醚培莠基,戈添燕戏分肇迟绶彀暾眨炀贸辈杏让芏仁×觯痬又钟着嘌澹孔祝靠譕.,鞭入嘌渑嘌S谂养的、用壬ǚḿ觳飧髯镺担私釭对增殖的影响。③对组腘诓煌奶跫、三个浓度、ヌヅ0咔下诱导分化,用免疫细胞化学方法检测虶泶镅粜月剩私釲、,訬只淘豹影响。⑥对培养豹绥瑰麓免疫鬃稳纯学方法检测帮,结合缁麓培养传琋葶珏增建缀腿核撬愿琍胺只笙赴纳窬L匾煨韵┐蓟琋蚪鸿宋岵妥珿,对痬痬,槿热隻/埽簃榧尤隻///,进行了鉴定。/郑州人学藉颂芯磕郾弦德畚入胚脑组织神经叶二细胞豹分离培养≮臻定/
。縝槠墙舷撇钜珿懿三令缀结果:①訬龌叩挠跋欤琈:色法检测结果显示;榛盍ψ罡撸珹缝,毽二者跣较差劈无显著链."贕訬璇殪的影响,色法镺蹈哂贐组,〔钜,篛涤隑组比较,无显著性差再,"郾衣度垒⑻峭掌鞣只棱南拢只旃允荆篈组、悍仲0ǎ的沈较无显著性差异,橛隑组问两项指标的比较有显著性差异;甈》。④同一培养基组丛础⒉煌盏挤只跫路只峁允荆悍只和。组、,培养的细胞表达、特异性抗原,分诧后的细腿表达珿旧ǹ杉翁湫偷纳偻唤褐氏赴结论。捎没捣掷敕ǚ稚苋伺遃疭组织,用无妞清培养基培养甃不鼹甓遂增鸯鬟的增殪速整,整胃提高捧缎元在分纯中的比镶。.谂嘌缙谙灾岣逳脑鲋郴钚裕航┎挥跋霳值径本实验培养的各组细胞,表达和,分化后袭达梁魄可觅少突荻暖缡慈,哥在薄乡靶瘆℃培募,谎疆培养麓籍稳是关键词:神经干细胞神经上皮干坌田胞蛋白攀唾液酸霞悉糖棒经节管脂代和分化情况,鉴定。组活力低于与楹虲组;橛階缌比较有驻著性整箨《;镺滤涓哂鐱检测结果显示:率高于椤组和椋珿率低于椤组和椋籆组与榧淞较钪副,细胞生长状态良好。免疫细胞化学白血病抑制因子人胚晌缎织神经十细胞韵分离培养与罄靛郑州大学属硕士研究生毕业论文。
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