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细胞生物学实验.ppt

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细胞生物学实验.ppt

上传人:文库新人 2020/3/3 文件大小:6.43 MB

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文档介绍

文档介绍:细胞生物学实验三、实验用品(一)仪器50ml烧杯、10ml移液管、试管。(二)******/L***///L丙醇(三)材料鸡红细胞悬液四、实验步骤(一)鸡红细胞悬液取50ml小烧杯一只,***化钠溶液,形成一种不透明的红色液体,此即稀释的鸡血。(二)低渗溶液取试管一支加入10ml蒸馏水,然后再加入1ml稀释的鸡血,注意观察溶液的颜色变化,由不透明的红色逐渐澄清,红细胞发生破裂,造成100%红细胞溶血,使光线比较容易透过溶液。(三)***化钠溶液10ml,再加入1ml稀释的鸡血,轻轻摇动,注意是否有颜色变化?是否有溶血现象?为什么?***化铵溶液10ml,再加入1ml稀释的鸡血,轻轻摇动,注意是否有颜色变化?是否有溶血现象?若发生溶血,记下时间(自加入1ml稀释鸡血到溶液变成红色透明澄清所需时间。,步骤同2。五、实验结果将观察到的现象记录,并进行分析、比较。:上层浅黄色透明,下层红色不透明为不溶血(-),镜检红细胞完好呈双凹盘状。,上层带红色者,称不完全溶血(+或++),镜检有部分红细胞呈碎片。,称完全溶血(+++),镜检发现细胞全部呈碎片。六、实验报告书写实验报告,并就细胞膜对不同物质的渗透性不同,对实验结果进行分析见表。目测法判断标准:快速溶血:+++;慢速溶血:++或+;不溶血:-实验五人淋巴细胞培养(一)(primaryculture):从动物机体取出的进行培养的细胞群。原代培养的细胞生长比较缓慢,而且繁殖一定的代数后(一般10代以内)停止生长,需要从更换培养基。(subculture):培养细胞的生存环境是瓶皿或其他容器,生存空间和营养是有限的,当细胞增殖到一定密度后,需要分离出一部分细胞并更新营养液,这一过程称为传代。将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养(Passage)。(cellstrain):从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群,能够繁殖50代左右,在培养过程中其特征始终保持。(cellline):从肿瘤组织培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞,在培养条件下可无限繁殖。原代培养经传代后形成的细胞群体,由多个生物学性状不同的细胞群体所组成,具有特殊的生物学性状或标记,分为: 有限细胞系(finitecellline,多数是二倍体)不能连续传代或传代次数有限。无限细胞系(infinitecellline多数为异倍体)可连续传代。有的无限细胞系在具永生性同时也有致瘤性,(clone):亦称无性繁殖系或简称无性系。对细胞来说,克隆是指由同一个祖先细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群。细胞克隆(cellcloning):从一个单一母细胞繁殖出来的细胞群体,细胞克隆方法包括:稀释铺板法、饲养层克隆法、琼脂克隆法等。