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实验五植物染色体核型分析.ppt

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实验五植物染色体核型分析.ppt

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实验五植物染色体核型分析.ppt

文档介绍

文档介绍:、植物、真菌等真核生物的某一个体或某一分类群(亚种、种、属等)的细胞内具有的相对恒定特征的单倍或双倍染色体组。染色体的特征以有丝分裂中期最为显著,包括染色体的数目、长度、着丝粒的位置、随体(指某些染色体末端的球形小体,由着色浅而狭细的副缢痕与染色体臂相连)与副缢痕的数目、大小、位置以及异染色质和常染色质在染色体上的分布等。。1952年美国细胞学家徐道觉首先采用低渗处理技术使细胞内的染色体分散而便于观察,以后秋水仙素的应用使增殖中的细胞停止于中期,从而便于获得大量供观察的中期分裂相,植物凝血素(简称PHA)刺激白细胞分裂的发现使以血培养方法观察动物与人的染色体成为可能。随着各种培养、制片、染色技术的改进使核型的研究进入了蓬勃发展的新阶段。1956年瑞典细胞遗传学家庄有兴等报告了人的染色体数是46而不是过去认为的48。1959年以后在人类中发现越来越多的各种各样的染色体异常。1960年4月在美国丹佛市召开的国际学术会议上对人的染色体分群和命名的术语、符号、方法等作了统一规定,在第五次国际人类遗传学会议上产生的人类染色体命名常务委员会又于1977年专门召开了会议进行修订,会后公布了《人类细胞遗传学命名国际体制()(1978)》。1981年该委员会又公布了《人类细胞遗传学高分辨显带命名国际体制》,在1977年所制订的中期染色体带型命名规定的基础上提出了高分辨的晚前期和早中期染色体带型命名规定和模式图。这些规定目前为世界各国学者所普遍采用。一般的染色体核型常常会遇到三种难题:(一)是由于在制片过程中染色体的大小和形态会发生一些改变,特别是在染色体大小和形态相近的不同号数的染色体之间难以鉴别,如人类的C组(从第6对到第12对)染色体就难以准确鉴别,有时寻找一对同源染色体也较困难,只好凭着主观的判断,因此“错点鸳鸯谱”的现象也很难避免;(二) 难以确定重复、缺失和倒位的存在,更难鉴别其类型,如是相互易位还是单向易位,是末端易位还是中间易位等等。三 是染色体没有一定的界标,在基因定位时难以描述,比如红绿色盲的基因定位在染色体的长臂上,但具体的位置如何描述才能使人一看就知道其座位及和其它基因的关系呢?为了解决这些问题,人们又发展了一项技术那就是染色体的分带染色。分带染色技术是将未染色的中期染色体片经过一定的预处理,再用不同的方法染色,使染色体上出现明显而稳定的染色条带。每一号染色体都有不同的带型,这样以上三大难题也就迎刃而解了。分带技术由于染色与预处理的方式不同可产生不同的带型,因此有G带、C带、Q带、N带和R带等不同技术。G带技术是其中最常用的技术,由Pardue和Gall(1970)建立。方法是先用加热或蛋白水解酶处理未染色的中期染色体片,然后用姬姆萨(Giemsa)染料染色,结果染色体呈现清晰、特异的G带(Gbanding)。G带反映了染色体DNA上A-T的丰富区,在人类中约有2000条G带可被鉴别。G带不仅稳定且用扫描电镜可在带区见到收缩的痕迹。现在已制成人类的G带标准图谱。可用于鉴定染色体号数以及基因定位。在植物中G分带技术尚不成熟,不少植物中难以显示G带或者结果很不稳定。,主要用以显示染色体中的组成型异染区,如着丝粒带。常用于植物的染色体分类。图10-27人类的C带核型(转引自Russell,1992)图10-28人类的Q带核型(转引自Russell,1992)Q-带是在1968年由Caspersson等建立的。这种方法是将中期染色体用芥子奎吖因(guinacrinemustard)染色,在染色体的G-带相同区域产生另外荧光带,在荧光显微镜下可以清晰地看到。虽然可以用于诊断,但受到荧光染色所限,不能长期保留。