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免疫重建SCID小鼠EBV诱导的B淋巴母细胞瘤模型的建立.pdf

文档介绍

文档介绍:中国协和医科大学
硕士学位论文
免疫重建SCID小鼠EBV诱导的B淋巴母细胞瘤模型的建立
姓名:陈冬青
申请学位级别:硕士
专业:免疫学
指导教师:何维;崔莲仙

缩略词一览表异硫氰酸荧光素辣根过氧化物酶外周血淋巴细胞外周血单个核细胞磷酸缓冲盐水牛血清白蛋白分化抗原脱氧核苷三磷酸溴化乙锭病毒乙二胺四乙酸酶联免疫吸附试验荧光激活细胞分选仪胎牛血清免疫球蛋白白介素淋巴母细胞样细胞系光密度聚合酶链反应—中国医学科学院硕士学位论文
核糖核酸酶每分钟转数十二烷基硫酸钠辅助性赴四甲基联苯胺三羟甲基氨基甲烷严重联合免疫缺陷,産中国医学科学院硕士学位论文
免疫重建小鼠盏嫉腂淋巴母细胞瘤模型的建立中文摘要具有人的免疫系统的动物模型对于生物医学研究有重大价值,为此∈筇迥诠菇巳说拿庖呦低衬P停⒃诖嘶∩辖⒘薆淋巴疫细胞δ芩厝毕菪∈螅芙邮苋说拿庖呦赴囊浦病N颐墙骨唤又钟赟∈筇迥冢诮又趾蟮牡周可在小接种后的第周在小鼠静脉血中检测出人的馨拖赴置诘腎,模型建立获得成功。研究发现,病毒腥綛淋巴细胞后可导致馨湍赶胞瘤,然而迄今为止尚无理想动物模型供这一现象的深层机制研究。为此,我们拟通过人外周血淋巴细胞免疫重建的小鼠模型来验证是否可导致馨拖赴腥静⒊闪觥∈蠼又秩送庵苎5ジ龊讼赴芎螅骨唤又諩悬液,于接种牡周解剖各组小鼠,观察腹腔各脏器的肿瘤形成情况,并用组织形态学检查、组织化我们在严重联合免疫缺陷母细胞瘤的小鼠模型。小鼠是体液免疫细胞拖赴稣H说耐庵苎5ジ龊讼赴鼠肝脏和脾脏内检测出人的、、虲细胞,并于这表明用人的外周血淋巴细胞免疫重建的小鼠甈甋
主里墨鲎型兰堕堡主兰垡堡壅———————————』一基因编码的蛋白;琢鱿赴芪Э杉觳獬錾倭康娜说腃学方法以及椒ḿㄋぶ琢龅男灾剩欢运纬傻牧隹榻蠸小鼠皮下接种,并对小鼠形成的腹水细胞作传代培养并进行流式细胞检测,以进一步证实所长肿瘤的特征。解剖结果显示在免疫重建芎螅谛∈蟾骨荒谟兄琢鲂纬桑鎏寤,而所设的对照组、哉兆楹涂瞻锥哉兆榫醇兄琢錾ぃ染色结果证明所长的肿瘤均为高分化的馨湍赶赴觯蛔橹而小鼠形成的腹水细胞可在体外无限传代,流式细胞仪检测表明该腹水细胞为赴徊剿得鱁在免疫重建的小鼠体内形成的瘤块和腹水属于馨拖赴觥I鲜鼋峁砻鱁诱导的人巴细胞瘤模型在免疫重建小鼠体内获得成功。综上所述,我们成功建立了..小鼠的模型,并在此基础上成功建立了免疫重建小鼠的人馨湍赶赴瞿P停Q究人类肿瘤免疫提供了一个理想的动物模型。关键词外周血单个核细胞病毒免疫重建小鼠小鼠接种验结果表明琢鱿赴杀泶顲肿雍虴细胞、赴虲细胞。觳庀允局琢鲎橹腄在Τ鱿痔匾斓腅扩增条带。对所形成的瘤块进行小鼠皮下接种,芎笤赟∈笃は掠兄琢錾ぃ鎏寤..:人馨湍赶赴
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.瓾畃甒瓵猄,,甀瓵,畃,.,,甈.,甌甌士中国医学科学院硕士学位论文
.瑃,,主里墨兰型兰堕堡主堂垡堡苎··甌,,
前言小鼠是晔状伪ǖ赖摹Q现亓:厦庖呷毕菪鼠其突变基因符号为,属隐性突变基因,发现于疘品系,位于小鼠第号染色体。纯合子基因疭导致淋巴细疫细胞δ芩厝毕荩溲G逯屑觳獠怀雒庖咔虻鞍祝庵苎A馨细胞的数量较大程度减少。研究表明,基因仅影响虰淋巴细胞的分化发育,并不影响杀伤细胞的功能。小鼠的淋巴细胞发育障碍发生在分化为赴赴螅琓和馨拖赴毕莨橐蛴诳乖芴逯刈槊赶低骋斐#不能正常重排,进而不能表达正常的细胞膜表面抗原受体。小鼠能接受人的器官和组织移植物,可用来分析人类免疫系统的发育,并使得研究破坏免疫功能的病毒以及引起免疫和血液系统肿瘤近年来,人们已经应用了两种有关小鼠免疫重建的动物模型。一、—猄逗咸濉阂浦踩说耐庵苎A馨拖赴,裂现亓:厦庖呷毕∈筇迥冢欢瓾嵌合体脚:小鼠的免疫系统来源于人的胚胎移植ㄐ叵佟⒏巍⒘馨徒胞发育分化过程严重受阻,因此这种小鼠体液免疫细胞拖赴其它骨髓干细胞包括红细胞、粒细胞和巨噬细胞的分化,也不影响自然致编码免疫球蛋白重链的嘏乓斐#灾驴乖芴寤騐的病毒成为可能。中国医学科学院硕士学位论文
年等【首次提出向小鼠腹腔接种一定量的人外周年取】证明大多数稍诿庖咧亟ǖ腟∈筇迥诖婊等G罢哂捎谝浦埠笤赟∈筇迥谌说某墒烀庖呦赴喽越隙嘁约实际操作简便等有利因素,使其在生物医学领域很受欢迎。血淋巴细胞稍赟∈筇迥诮腥死嗝庖吖δ艿闹亟ā埽缓笞匀凰劳觥1狙芯坷妹庖咧亟⊿∈蟮恼庖惶匦裕谄涮迥谧;疊细胞,成功建立了人类馨湍赶赴龅哪P停进一步研究人类肿瘤免疫的机制提供了一种新的方法。中国医学科学院硕士学位论文

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