实验二利用SDSPAGE分析融合蛋白的可溶性.ppt

文档介绍：实验二利用SDSPAGE分析融合蛋白的可溶性利用SDS-;-PAGE的原理、实验操作过程及重要性。实验原理基因的基本结构基因转录区启动子 ATG终止子TGAORF:OpeningReadingFrameRNA起始点核糖体结合位点实验原理影响基因表达的因素:启动子:控制基因表达的第一步,是高表达的关键;结构基因:密码子稀有性;表达载体的拷贝数:商业化,pET系列、pGEX系列等。实验原理目的基因:受噬菌体T7强转录、翻译及终止信号控制;Lac操纵子;T7RNA聚合酶启动;IPTG诱导;有His-tagg标签;:pET28a-svixyn/BL21(DE3)(1).培养基:LB液体培养基(2).: 丙烯酰胺29g;甲叉丙烯酰胺1g,加水至100ml,置于棕色瓶中,4℃存放。×浓缩胶缓冲液:1mol/LTris-HCl,,4℃存放。