文档介绍：华南理工大学
硕士学位论文
内切菊糖酶的分离纯化和应用初探
姓名:史贤俊
申请学位级别:硕士
专业:生物化工
指导教师:林影
20030501
摘要酶粗酶液中分离提纯内切菊糖酶,并在此基础上探讨了畁内切菊糖切菊糖酶、外切菊糖酶屯馇芯仗敲窱>璖—凝胶电泳检测,,虳,随着反应时问的增长,主要产生珼和衫,反应时间为∈弊笥疑途酃本论文主要探讨了使用离子交换层析的方法从仗酶和外切菊糖酶的动力学性质,对内切菊糖酶的应用进行了初步探讨。利用畁菊糖酶中各酶组份的等电点和分子量的不同,选用一离子交换介质,从畁菊糖酶中分离得到内内切菊糖酶、外切菊糖酶屯馇芯仗敲窱汲氏值ヒ坏牡鞍滋醮子量分别为,ァ±%和,纋ィ谇芯仗敲畁内切菊糖酶、外切菊糖酶屯馇芯仗敲窱呋崽呛途糖进行水解反应。内切菊糖酶催化蔗糖水解反应最适约为,最适温度为℃,最大反应速度为痬,米氏常数为痬,米氏常数为。℃和℃,最大反应速度分别为癿/米氏常数分别为和;而催化菊糖水解反应最适分别为和,最适温度分别为℃和℃,,米氏常数分别为和。菊糖是内切菊糖酶、外切菊糖酶屯馇芯仗敲窱奶烊环从底物。畁内切菊糖酶、外切菊糖酶屯馇芯仗敲窱詐奈榷ㄐ一范围内比较稳定;夕芯仗敲傅娜任榷ㄐ员内切菊糖酶高,内切菊糖酶和外切菊糖酶在℃时都相对稳定。用内切菊糖酶在温度℃,糖。外切菊糖酶饩仗堑牟镏饕1硐治狣和葡萄糖:外切菊糖酶水解菊糖的产物主要为咸烟呛虳,但相对于推咸糖的量,纳闪渴羌俚摹关键词:内切菊糖酶;离子交换层析;动力学;,在摘要痬,.
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潲支拶华南理工大学学位论文原创性声明学位论文版权使用授权书史日期:沙;年翴日期:贒;年拢日期:冲;年本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权华南理工大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密口,在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密囱。朐谝陨舷嘤Ψ娇蚰诖颉啊獭导师签名:≯
第一章绪论菊糖酶内切菊糖酶水解果聚糖链的方式,菊糖酶可以分成两类一果聚糖,,它能水解菊糖的多糖链内部的呋喃果糖苷,果糖水解酶类酶不能水解松三糖,尽管松三糖与菊糖的末端结构完全一致薄薄啊盝。不同菌种所产内切菊糖酶的性质有所不同,一些一些产内切菊糖酶的微生物及其内切菊糖酶的性质菊糖酶悄芄凰釨一一果聚糖果糖苷键的一类水解酶,学名为,还厶敲福纸还擒彰浮一果聚糖水解酶、.还厶撬.,主要来源于菊科植物组织和部分微生物。前者的底物专一性较强,主要作用于菊糖;而微生物产生的菊糖酶的底物专一性普遍不强,大部分都能水解具有,卜呋喃果糖键的菊糖、蔗糖和棉籽糖,属反应专一性N⑸锞仗酶主要来自霉菌、酵母菌,偶见于细菌,且霉菌的菊糖酶活性高于酵母8解酶还厶擒占档土司酆隙鹊牡途酃牵死嗝缚伤馑扇牵狣一.,即外切菊糖酶,从非还原端逐个水解,卜果聚糖苷键,产生一分子果糖和少一个果糖单位的果聚糖,此内切菊糖酶主要来源于产内切菊糖酶的微生物及其酶的性质见表。酶、等”’和表】【】第一章绪论.、.、—.~甇~.~—.~.——
幕斗。擘孓●●●可提高内切菊糖酶活性,琀埃月雀吖郊姿幔宕牾0罚碳二亚胺能够完全抑制内切菊糖酶的活性,和“使内切菊糖酶活性损失约%,此外,、啊啊啊阅谇芯仗敲富钚杂跋觳幌灾关于金属离子对内切菊糖酶活性的影响也有不同的报道。当前,国内外对内切菊糖酶的研究主要集中在以下几个方面:秆「呙富睢⑽榷ㄐ院谩⒔,以及去阻遏的突变株;对内切菊糖酶的酶学性质以及产酶发酵条件的研究;票改谇芯仗敲傅,分析其序列,,构建基因工程菌;潭谇芯仗敲富蚶盟谇芯仗敲阜ɡ瓷聚果糖“”。内切菊糖酶的作用特性为:从菊糖分子内部随机切断糖昔键,其产物为、、、、、等低聚果糖俊D谇芯仗敲杆饩仗鞘