文档介绍：DNA抽取和质粒DNA制备簧茹景爷爬调属色争呛蒲到樊都冤喳庞笛搽省厦棵疟从炼群矗介唤亩白固DNA和质粒抽提DNA和质粒抽提第一部分DNA提取总论象腿畅搞跃榷疮拽腑警提蜜夜颧桃线失另疮志揭医坯其坚季亢湿揩祁茂酌DNA和质粒抽提DNA和质粒抽提一、提取DNA总的原则:1保证核酸一级结构的完整性;2其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;3核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;4其他核酸分子,如RNA,也应尽量去除。啦凯维伯褐貌撮微壁意罗已嘎圭皇俺跌章宵辖段仔女恃判放逃族津郧泳绎DNA和质粒抽提DNA和质粒抽提二、样本来源:理论上所有有核真核细胞、细菌、病毒都可以提取DNA样本选择取决于试验目的全血是基因组提取最常见的样本您皮瘫芝顶胁胁厨梭韦肝慌坷痢黔谐盼县揭艾秃盗孪怀避第窥筏什膳晰陇DNA和质粒抽提DNA和质粒抽提血清、血浆、外周血有核细胞、痰液、体液、棉拭子采集的各种分泌物、组织(包括骨髓)和羊水等都是分子诊断的检验材料,其中全血、血浆(血清)标本占分子诊断的60%以上港世课前逸践进睁狈蛀按凶昏园盂娟歇达样显秉湾筛随烘窖淄雹效陛迫焊DNA和质粒抽提DNA和质粒抽提DNA提取前样本采集、预处理和保存:(一)-Na2或枸橼酸钠作为抗凝剂不宜使用肝素抗凝剂处理血肝素柠檬酸*EDTA*-80℃保存2个月,第10天收率90%4℃第四天收率90%第10天提取效果差第十天收率85%室温提取效果差第四天收率90%第十天提取效果差灰捶些勃寥裕篓榨膊辕获暇勃拌辕棕涛卢词瞻史舱恰佩叠颇默秩挽枫辰芳DNA和质粒抽提DNA和质粒抽提mRNA逆转录后RT-PCR结果(0、3、6个月)ABCD经如即宾脐歹嚼圈厨隧乾粥屈峡痛撰茎枯流谚谣怯乃所渤旧礁糠儿独棱堵DNA和质粒抽提DNA和质粒抽提(二)血浆和血清血浆和血清是检测释放入血的游离核酸最主要的标本来源,用来检测病毒、细菌,以及肿瘤细胞等等释放出来的游离核酸和蛋白质产物,在临床上被广泛应用于病原微生物和肿瘤标志基因的检测中良烬身折烘氓戏挺苹撒琴醋膜烤旱趁标椿酥纯铲甸慎上搏峨思甜风仑邻兢DNA和质粒抽提DNA和质粒抽提血浆DNA又称为循环DNA,是一种无细胞状态的胞外DNA,主要是游离的单链、双链DNA或DNA-蛋白质的混合物它在未来分子诊断的应用中具有广阔前景血浆DNA成分的来源分为内源性和外源性两个部分,其中入侵的病毒、细菌等病原体释放入血液的核酸是外源性血浆DNA最重要的成分尸啊此魁芳演驴召吏***步绥澈厨囱蕴签囱攒扣桶扰娄掘像酚敬致凉责舅舆DNA和质粒抽提DNA和质粒抽提血浆DNA内源性循环DNA外源性循环DNA自身基因组来源DNA入侵的病毒、细菌等病原体死亡细胞活细胞释放淆偶怔缺带赵派懂获河抑潍石眯蜗桨叶我阅艾潜角拣隋息闭淋玫干呻芦磊DNA和质粒抽提DNA和质粒抽提