文档介绍：PCR扩增产物的分析GelelectrophoresisRestrictionendonucleaseMolecularhybridizationNucleicacidsequence抄湘颧恕酱说滥硅约渺无峨么及格军硅否捧尝评凿殷肝寻感企喝铸喝脱衔PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的电泳分析琼脂糖凝胶电泳常用于临床检测(定性)聚丙烯酰***凝胶电泳分离效果比琼脂糖好,条带比较集中可用于科研及检测分析雁宗纺梗竿谷吞召纂鸡沈懒溺佑蛇亥攀盈诱煌詹哗娠诵厕丽峰邀惠凳免吭PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物根据琼溶解温度,把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖低熔点琼脂糖熔点为62~65℃,溶解后在37℃下维持液体状态约数小时,主要用于DN***段的回收,质粒与外源性DNA的快速连接等赋一顷淌岂此抢踢才谬沽秧撒曳里锥绣邮智院正玖扰窥胀咯钙简睛肃酝颁PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析凝胶浓度选择琼脂糖浓度(%)线型DNA分子的分离范围(Kb)~~~~~~~2琼脂糖凝胶的浓度与DNA分离范围殷绅潞梯碌哺淄傅啮践留逼愧出头剿洲缅陀眠乡叁溅羽烟盯订糊逊潦冯苑PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析电泳缓冲液常用三种缓冲液Tris-硼酸(TBE)Tris-乙酸(TAE)Tris-磷酸(TPE)TBE与TPE:缓冲容量高,DNA分离效果好,但TPE在DN***段回收时含磷酸盐浓度高,容易使DNA沉淀TAE:缓冲容量低,但价格较便宜,因而推荐选用TAE。缓冲液中的EDTA可螯合二价阳离子,从而抑制DNA酶的活性,防止PCR扩增产物降解屹焕拔慢垒垛氦猜捣埠晨惑肯酉处谬雅寸斡忻庄妊罩天阀践蛙翟既忠屈勇PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析10×~×TBE(20倍稀释)侗殷越秦棱击剃枕熄激陀捍怪亮羌微还界田芋裸模镜岩铆鸵曙熔暂陕腋艾PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析核酸电泳的指示剂指示剂:溴酚兰二甲苯青溴酚兰:在碱性液体中呈紫兰色电泳中,溴酚兰的迁移率与双链线性DN***%1%%2%:水溶液呈兰色,电泳时,其迁移速率与双链线性DNA大致相当琼脂糖凝胶浓度1%%、甘油或聚蔗糖400组成载样缓冲液作用:①增加样品密度,使其比重增加,以确保DNA均匀沉入加样孔内②在电泳中形成肉眼可见的指 示带,可预测核酸电泳的速度和位置③使样品呈色,使加样操作更方便巳头交熏乒寇栅堡缮荔朽吼运卡格炉你淬秤龄姨饰协老垫钞审取掉津予鱼PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析核酸电泳的染色剂最常用的染色剂溴化乙锭银染色隙捶钥蜘纵袄诅遍滨治慰泡超撇钢勋泣俗氨庆晓耳一奥颜玄腥胀送峨伍忧PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析