文档介绍：1药品微生物检查检查方法介绍药品微生物检查检查方法介绍(甘肃省药品检验所郭朝晖)2?无菌室的质量管理?菌种保存、复壮及管理?药品微生物限度检查方法?药品微生物检查法的验证3无菌室的管理无菌室的管理?陈设尽量简单,仅放置必需用的仪器设备?%新洁尔灭擦拭操作台及可能污染的死角,室内无菌空气过滤器及紫外灯杀菌1小时。?人员:肥皂洗手,%新洁尔灭洗手,换无菌服、鞋,进入。?操作必须符合无菌要求,穿好无菌服后,不能反复出入无菌间,手不能来回出入操作台。?在每次操作完毕,同样用上述消毒溶液擦拭工作台面,除去空气湿气,用紫外灯杀菌半小时。?非无菌室工作人员不得进入,对外来维修人员要进行监督。?缓冲间不得放杂物、培养箱等。?定期对门、窗、墙面等消毒。?定期检查洁净度情况。4?通常,实验室应划分成洁净或无菌区域和活菌操作区域,同时应根据试验目的,在时间或空间上有效分隔不相容的试验活动,将交叉污染的风险降低到最低。?一般情况下,药品微生物检验的实验室应有符合无菌检查法和微生物限度检查法要求的、用于具有开展无菌检查、微生物限度检查、无菌采样等检测活动的、独立设置的洁净室(区)或隔离系统,并为上述检验配备相应的细菌(真菌)等实验室、培养室、培养基及实验用具准备(包括灭菌)区、样品接收和储藏区、标准菌株储藏区、污染物处理区和文档处理区等辅助区域,同时,应对上述区域明确标识。?实验室应对进出洁净区域的人和物建立控制程序和标准操作规程,应按相关国家标准建立洁净室(区)和隔离系统的验证、使用和清洁维护标准操作规程,对可能影响检测结果的工作(如洁净度验证及监测、消毒、清洁维护等)能够有效地控制、监测并记录。5洁净度的要求洁净度的要求应在环境洁净度10000级局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须无菌。工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。65个基本概念⑴抑菌:抑制体内或体外细菌的生长繁殖。⑵防腐:防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。细菌一般不死亡。使用同一种化学药品在低浓度时为防腐剂,在高浓度时为消毒剂。⑶消毒:杀灭物体上病原微生物的方法。并不一定杀死含芽孢的细菌或非病原微生物。用来消毒的药品叫消毒剂。一般消毒剂在常用浓度下只对细菌的繁殖体有效,对其芽孢则需提高消毒剂的浓度和延长作用时间。⑷无菌:不存在活菌。⑸灭菌:杀灭物体上所有微生物的方法。比消毒要求高,它杀灭了包括细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原微生物。7灭菌和消毒的比较:共性:杀灭微生物以控制其污染和防止传染。区别:1、杀灭微生物完全性的差异。灭菌要求完全杀灭微生物,灭菌后的药品不应含有活的微生物。而消毒不完全杀灭微生物,只能杀灭一部分微生物即病原微生物。这是相对的。因为强效消毒剂在适宜条件下可能达到灭菌效果;不适宜条件下灭菌,有不完全杀灭微生物的可能。2、方法上的差异:灭菌方法具有多样性,消毒常借化学物质。3、效果检查的差异:灭菌效果用无菌检查法检测,而消毒效果以消毒剂的效价评定。8常用的消毒剂洁净室(区)常用的消毒剂甲醛薰蒸(作用机制:阻抑菌细胞核蛋白质合成。甲醛是一种常用的杀细菌和杀真菌剂。市售的福尔马林溶液就是37—40%的甲醛水溶液。常用于保存动物标本,也可以作气体熏蒸和液体消毒。甲醛有挥发性,对眼睛、皮肤有刺激性,引起皮肤硬化或皱褶,不宜做皮肤消毒用。)%新洁尔灭溶液(作用机制:使蛋白质变性,破坏细胞膜。) 75%酒精溶液(常用于皮肤消毒。能迅速杀死细菌繁殖体,对一般病毒有一定的消毒作用。)5%来苏水(甲酚皂)溶液(作用机制:损伤细胞膜)9灭菌的方法1、热力灭菌:主要是利用高温的致死作用,使微生物的蛋白质和核酸等重要生物高分子发生变性、破坏,而导致细胞死亡。分为干热灭菌与湿热灭菌(1)干热灭菌:灼烧与火焰灭菌、干烤灭菌灼烧主要用于接种工具灭菌,如接种针、接种环、刀、剪等在火焰上烧灼即可达到彻底灭菌。火焰灭菌是在无菌操作中,将试管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反复通过火焰数次,利用火焰对管口等进行灭菌,防止管口污染,作为无菌操作过程中的辅助灭菌手段。干烤灭菌是利用热辐射及干热空气进行灭菌。102)湿热灭菌法:通过热蒸汽或沸水使细菌蛋白质变性而杀灭微生物的方法。包括:煮沸灭菌、流通蒸汽灭菌、高压蒸汽灭菌煮沸灭菌:加热使水至沸而杀灭细菌的方法。凡不适于高压蒸汽灭菌的物品可常压下在水中煮沸一段时间达到灭菌目的。流通蒸汽灭菌:常压下,用蒸笼、蒸锅等在100℃灭菌。仅可杀死细菌繁殖体,不能完全杀灭芽孢。高压蒸汽灭菌:通过加压提高蒸汽温度,用高压蒸汽灭菌,穿透力强、温度高、灭菌效果最好。是最可靠最适用最广泛的灭菌方法,凡耐高温和潮湿的物品可应用本法灭菌。注意事项:完全排