文档介绍：课题3血红蛋白的提取和分离一、课题目标:通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离,理解色谱法、电泳法二、课题重点:凝胶色谱法的原理和方法三、课题难点:样品的预处理、色谱柱填料的处理和色谱柱的装填一、血红蛋白的提取和分离1、血液有哪些成分血液血浆水分固体物质:血浆蛋白、无机盐、磷脂、葡萄糖等血细胞白细胞血小板红细胞(最多)血红蛋白(90%)血红蛋白两个α-肽链两个β一肽链四个亚铁血红素基团每个肽链环绕一个亚铁血红素基团,此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳,血红蛋白因含有血红素而呈红色。2、血红蛋白的特点:思考:“课题1--DNA的粗提取与鉴定”实验理想的材料是什么?“课题3--血红蛋白的提取和分离”这实验理想的材料又是什么?原因是?答:鸡的红细胞具有细胞核,含有DNA,便于进行DNA的提取,哺乳类动物成熟的红细胞无细胞核,结构简单,血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白。一、基础知识:(一)蛋白质分离原理(二)蛋白质分离的方法1)凝胶色谱法:又称分配色谱法2)电泳法(三)缓冲液的作用一、蛋白质提取与分离的依据--蛋白质的物理化学性质差异:、(内含许多贯穿的通道,具多孔的凝胶就叫分子筛)根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法(2)概念:(1)凝胶洗脱:从色谱柱上端不断注入缓冲液,促使蛋白质分子的差速流动。混合物上柱洗脱大分子流动快小分子流动慢收集大分子收集小分子4、具体过程3、原理:当不同的蛋白质通过凝胶时,()的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程(),移动速度(),而()的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在()移动,路程(),移动速度(),相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。相对分子质量较小较长较慢相对分子质量较大凝胶外部较短较快总结:大分子经过路程短,流动快;小分子经过路程长,流动慢。凝胶色谱法分离蛋白质过程的动画演示