Smurf1转录调控的研究及MS9条件性敲除小鼠构建.pdf

文档介绍：,参与DNA损伤修复、细胞周期、细胞凋亡、细胞内吞、抗原呈递等几乎所有生物学过程。蛋白质的泛素化是一个高度有序且具有选择性的过程,由El、E2、E3、泛素及底物蛋白参与,E3决定了泛素化修饰过程的特异性。Smurfl(Smadubiquitinationregulatoryfactor1)是HECTE3泛素连接酶Nedd4家族中的主要成员,主要通过与Smadl、Smad5发生作用,。除了Smads,、小G蛋白RhoA、骨特异性转录因子Runx2以及磷酸化形式的MEKK2等也可被Smurfl泛素化降解。越来越多的研究表明Smurfl在癌症发生、病灶转移、骨形成等方面均起着重要的调节作用,因此以Smurfl作为靶点蛋白来进行药物筛选受到了越来越广泛的重视。但是,Smurfl的体内活性调控机制依然尚未阐明。为了探索Smurfl的转录调节机制,我们对Smurfl上游序列进行了克隆,构建了Smurfl基因报告系统,从中我们确定了上游序列里对下游基因表达影响较大的几个区域;、、敲低RhoA等条件对Smurfl转录的影响,发现他们之间并没有明显的联系。之前的研究表明MS9可能与Smurfl发生相互作用,为了进一步考察MS9的生理学功能,我们进行了MS9条件性敲除小鼠的构建。本文里我们完成了条件性敲除质粒的构建和ES细胞的筛选。关键词:报告基因;条件性敲除AbstractAbstractTheUbiquitin—,cellcycle,apoptosis,endocytosis,,whichismediatedbyacascadethatinvolvesEl,E2,andE3,(Smadubiquitinationregulatoryfactor1)-IB/BMPpathwaythroughtargetingSmadl,,,,,,includingTNF—a,TGF-IB/BMPandRhoAsignaling,,,wetriedtogene