蛋白质高效液相色谱技术.ppt

文档介绍：高效液相色谱法在蛋白质分离中的应用S健SSSS高效液相色谱技术特点概述1HPLC系统各组分介绍;2流动相的要求及准备过程354HPLC色谱技术与其他技术联用5HPLC应用举例6现状与展望6应用范围广高灵敏度高效高压分析速度快HPLC是近二十年来发展起来的一项新颖快速的分离技术。它是在经典液相层析法基础上,引进了气相层析的理论具有气相层析的全部优点。特点根据分离机理蛋白质HPLC又可分为1243高效凝胶过滤色谱(HPSEC)高效离子交换色谱(HPIEC)高效亲和色谱(HPAFC)反向高效液相色谱(RP-HPLC)高效液相色谱仪常用的HPLC仪Waters公司Agilent公司岛津公司等一进样系统进样方式隔膜进样*阀进样自动进样停流进样六通阀进样高效液相色谱系统中最理想的进样器,它是由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。美国Rheodyne公司的六通阀进样器最为通用,各大HPLC仪器制造商均以此产品作为仪器的进样器。上样分析开始分析废液样品淋洗液至分离柱进样阀样品装样废液淋洗液至分离柱定量环进样(LOAD)(INJECT)样品环进样方式部分装液法进样量应不大于定量环体积的50%(最多75%),并要求每次进样体积准确、相同。缺点是易产生由进样引起的峰展宽完全装液法进样量应不小于定量环体积的5~10倍(最少3倍),这样才能完全置换定量环内的流动相,消除管壁效应,确保进样的准确度及重复性