文档介绍：人粒细胞集落刺激因子( G-CSF )酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中粒细胞集落刺激因子(G-CSF )的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人粒细胞集落刺激因子(G-CSF )水平。用纯化的人粒细胞集落刺激因子(G-CSF )抗体包被微孔板,制成固相抗体, 往包被单抗的微孔中依次加入粒细胞集落刺激因子(G-CSF ),再与 HRP 标记的粒细胞集落刺激因子(G-CSF )抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物, 经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品的粒细胞集落刺激因子(G-CSF )呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD值),通过标准曲线计算样品中人粒细胞集落刺激因子(G-CSF )浓度。试剂盒组成: 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置保存说明书 1份1份封板膜 2片( 48)2片( 96) 密封袋 1个1个酶标包被板 1×481×962-8 ℃保存标准品: 45ng/L × ×1瓶2-8 ℃保存标准品稀释液 × ×1瓶2-8 ℃保存酶标试剂 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8 ℃保存样品稀释液 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8 ℃保存显色剂 A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8 ℃保存显色剂 B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8 ℃保存终止液 3ml ×1瓶6ml ×1瓶2-8 ℃保存浓缩洗涤液(20ml ×20倍) ×1瓶(20ml ×30倍) ×1瓶2-8 ℃保存样本处理及要求: :室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20分钟左右( 2000-3000 转/ 分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 :应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心 20分钟左右( 2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成, 应该再次离心。 :用无菌管收集,离心 20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 :检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20分钟左右(2000-3000 转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS (- )稀释细胞悬液,细胞 2浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20分钟左右( 2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 :切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS , 。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8 ℃的温度。加入一定量的 PBS ( ),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20分钟左右( 2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 ,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20 ℃保存,但应避免反复冻融. NaN3 的样品,因