文档介绍：Q/KM —ZJ— —2008液体洗涤剂杀菌试验规程(内部使用)2008 年月日内部执行质量管理中心实验室引用标准1、GB15979-2002 一次性使用卫生用品卫生标准2、QB/T2738-2005 日化产品抗菌抑菌效果的评价方法3、QB/T2850-2007 抗菌抑菌型洗涤剂4、2002年版《消毒技术规范》 ( 中华人民共和国卫生部 )5、2001年版《药品微生物学检验手册》 (科技出版社)杀菌率试验规程1、试验菌、试验温度、作用时间、试液浓度试验菌种:金黄色葡萄球菌( 6538),大肠杆菌(25922),白色念珠菌。试验温度:20℃±1℃。5kDb7。作用时间:最短不得小于 30s。常规作用时间为 2min、5min、10min、20min。试液浓度:中和剂鉴定用试液浓度应为正式杀菌试验最高浓度。qHxFq。菌悬液用量:正式杀菌试验用菌悬液的浓度、取量应与中和剂鉴定中 1组、2组所用菌悬液的浓度、取量相同。9LxtN。2、细菌繁殖体悬液、菌片的制备程序 :⑴ 取冻干菌种管,在无菌操作下,以毛细吸管加入适量营养肉汤,轻柔吸吹数次,使菌种融化分散。- 营养肉汤培养基试管,滴入少许菌种悬液,置 37℃培养18h~24h。用接种环取第 1代培养的菌悬液,划线于营养琼脂培养基平板上,于 37℃培养 18h~24h。挑取上述第 2代培养物中典型菌落,接种于营养琼脂斜面,于 37℃培养18h~24h,即为第 3代培养物(放在 4℃左右冰箱中保藏。每隔2-3个月移种一次,继续保藏。)。2VQIC。⑵ 取第 3代~14代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物(经 18h~24h培养),用 - 稀释液加入斜面试管内 ,反复吹吸,洗下菌苔。随后,用 ,在手掌上振敲 80次(力度适中,勿溅出),以使细菌悬液均匀。或从新鲜菌种斜面沾取少量菌苔,接种在适合试验菌生长的培养基中, 37℃培养18h~24h(或适宜时间)。作为原菌液。(源于《药品微生物学检验手册》 211页)bKQzZ。⑶ 细菌繁殖体悬液应保存在 4℃冰箱备用。尽量减少在室温下放置时间,以减少细菌的自然死亡。应当天使用不得过夜。XwHMe。4 4回收菌数为 1×10~9×10cfu/ml 用PBS液配置 GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》回收菌数为 1×108—5×108cfu/ml用TSB营养肉汤配置—2002《消毒技术规范》WN0i0。、菌片的制备程序 :《消毒技术规范》⑴ 取冻干菌种管,在无菌操作下,以毛细吸管加入适量营养肉汤,轻柔吸吹数次,使菌种融化分散。- 营养肉汤培养基试管,滴入少许菌种悬液,置 37℃培养18h~24h。用接种环取第 1代培养的菌悬液,划线于营养琼脂培养基平板上,于 37℃培养 18h~24h。挑取上述第 2代培养物中典型菌落,接种于营养琼脂斜面,于 37℃培养18h~24h,即为第 3代培养物。JrOmx。⑵ 取第 3代~14代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物(经 18h~24h培养),用吸管吸取XWI3z。- TSB营养肉汤加入斜面试管内,反复吹吸,洗下菌苔。随后,用。无菌试管中,在手掌上振敲 80次,以使细菌悬液均匀,含菌量 1×108—5×108cfu/ml。uUfmt。⑶用无菌镊子夹住已灭菌 10mm*10mm滤纸一角,一面朝上,注入 10ul 菌悬液,放到无菌平板内, 37℃温箱中干燥 20min-30min,(或在室温自然阴干后使用)制成菌片。每个菌片回收菌落,按活菌培养计数所得结果,应为 5×105—5×106cfu/片。)Ofpsy。⑷细菌繁殖体悬液和菌片,用毕应随时保存在 4℃冰箱内。尽量减少在室温下放置时间,以减少细菌的自然死亡。(应当天使用不得过夜。)wheDZ。3、、悬液定量法杀菌试验操作程序⑴、样品用无菌标准硬水稀释至同中和剂鉴定用试液浓度,或低于中和剂鉴定用试液浓度,制成(稀释液)试验样液。SSAOl。⑵、将试管按需要数量分别排列于试管架上,各组由左向右,排序、标记。4 4⑶、配制菌悬液,浓度为 1×10~9×10cfu/ml—GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》或 18 8×10—5×10cfu/ml—2002《消毒技术规范》⑷、取杀菌试验用无菌大试管,先加入 ,再加入 ,混匀,置20±1℃5min,用无菌吸管吸取步骤 1中的试验样液 ,立即开启计时器,并迅速混匀(在手掌上振摇 80