文档介绍：石斛兰的组织培养作者:杨恩富 专业:设施农业技术班级:设农08-1班学号:33号指导教师:陈霞[摘要]:运用组织培养相关知识,对石斛兰做了简单的组织培养阐述。大致方向为:(一)培养目的一一通过石斛兰的组织培养,加强我对石斛兰的了解以及石斛兰在组织培养中所注意的事项,同时为学习组织培养这门课程打下坚实的基础;(二)培养方法一一选择石斛兰的叶片、茎段腋芽、根系在营养基中进行组织培养;(三)简单介绍石斛兰生根培养和炼苗技术。通过本篇论文,加强自身对石斛兰的了解,并对其生理特性有一定的认知。组织培养技术,用组织培养法繁殖植物,这是组织培养应用于生产的主要的和成效最大的实例。所以,石斛兰的组织培养,更加肯定了组培价值所向’关键词:石斛兰组织培养炼苗一、石斛兰(Dendrobium)的概述石斛兰(Dendrobium)^兰科多年生附生落叶或常绿草本植物,原产屮国、日本及澳人利亚等国家,是一种观赏价值很高的花卉,其花姿态优美,花色艳丽多彩,花多而且花期长,深受人们喜爱。冇斛兰有600种原生种,连混合交配种在内约有7000种。从形态上可分节生种和蝴蝶兰花形种两大类。在繁殖上,因为儿乎所有的观赏类冇斛都是杂种,通过种子播种不能得到人量与亲代形状一致的植株。目前石斛兰主要采用分株繁殖,繁殖速度缓慢。我国从20世纪70年代屮期开始,对石斛的纽织培养进行了大量研究,进展很快。但n前石斛兰的组织培养采川的外植体基本上都是茎尖、新生芽,由于每株植株体上这些材料有限,所以茎尖、新生芽作为外植体材料的组织快繁在生产上应用难度较人。虽然通过叶片诱导能够诱导出类原球茎,如S鸥飓等采用幼茎的侧芽和顶尖的分生纽•织分化出类原球茎。但市于冇斛兰类原球茎的诱导机理没有研究清楚,通过类原球茎分化完整植株的途径还有很大的难度。二、外植体的选择无菌外植体的获得:从无病虫害的母株上选择健壮、叶片未展开的幼芽,用己消毒的刀片切取4〜12cm,并将外围叶片剥除,仅留顶端0-3cm叶鞘,放入锥形瓶中,用纱布封闭瓶口,自来水流水冲洗30min,然后用70%酒精消毒lmin,l%oHgCl,处理8min,最后用无菌水洗4〜5次,将外植体置入无菌烧杯,、~,呈锥螺状,具顶芽1个、腋芽3〜4个(每层各有1个)。%〜5次后、切除叶鞘。然厉将顶芽与腋芽分开,取从下往上数第2〜3个腋芽作外植体(第1个腋芽较难消毒,第4个芽易成苗、较难诱导出原球茎),备用。三、石斛兰各组织诱导石斛兰叶片愈伤组织的诱导、石斛兰茎段腋芽的诱导、石斛兰根系的诱导。(一) 石斛兰叶片愈伤组织的诱导1•叶片愈伤组织诱导培养基叶片愈伤组织诱导培养基以MS为基本培养基,根据生长调节剂的组成、浓度设5个处理。处理A:MS+2,4-;处理B:MS+2,4-+6-;处理C:MS+2,4-+6-\L;处理D,MS+2,4-+6-;处理E,MS+2,4-。5种叶片愈伤组织诱导培养基中均附加琼脂6dE,蔗糖20L,活性炭3L,〜。,用解剖刀切成lcmXlcm的小块,接种在诱导培养基上。