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培 养 基 配 制.doc

上传人:xxj16588 2016/3/7 文件大小:0 KB

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文档介绍

文档介绍:培养基配制 1) 血平板: 5%脱纤维绵羊血琼脂平板。英国 Oxoid 公司哥伦比亚琼脂( 或 TSA 琼脂或脑心浸液琼脂)加热溶化后,高温高压灭菌,用时冷却至 50 0C左右, 加入无菌 5-10% 脱纤维绵羊血,充分轻摇混匀后,倾制平板,血平板厚 4mm 。 2) 巧克力平板: 应用马血或兔血制备,市售哥伦比亚琼脂热溶化后,高温高压灭菌,约在 80 0C左右加入无菌血液配成 5-10% ,摇匀后置 80 0C左右水浴中维持 15分钟,使之成为巧克力色,絮状,取出冷却至 50 0C左右倾制平板。因其中含有 X和V因子,嗜血杆菌、奈瑟氏菌等生长良好。若用绵羊血制备,则要加入 X、V因子添加剂(按产品操作说明)。 3) 庆大霉素血平板:(分离肺炎链球菌培养基) 哥伦比亚琼脂 250mL 绵羊血 庆大霉素 附:庆大霉素配法: 4万单位+16mL 水= 1万单位( u)=10mg 4万单位=40mg 4) 杆菌肽巧克力平板: (分离流感嗜血杆菌培养基) 哥伦比亚琼脂 250mL 兔血(马血) 杆菌肽 lmL 附: 杆菌肽配制: 760mg 杆菌肽加 10mL 灭菌水。 2. 250mL 兔血巧克力加入 1mL(76mg/mL) 杆菌肽。杆菌肽最终浓度: (300mg/L) 5) 万古霉素巧克力平板(分离流感嗜血杆菌培养基) 哥伦比亚琼脂 250mL 兔血(马血) 万古霉素 (5mg/250mL) 附:万古霉素配制法: (去甲万古霉素 400mg/ 瓶,相当 500mg/ 瓶万古霉素,分装 80 支) 1 一瓶 400mg 去甲万古霉素加 % NaCl 10mL=50mg/mL 2 1mL 万古霉素( 50mg/mL )加 % NaCl 9mL=5mg/mL 6) 高盐甘露醇琼脂: (分离金黄色葡萄球菌培养基) 蛋白胨 10g 牛肉浸膏 1g ***化钠 7g琼脂 15g 水1000mL 甘露醇 10g % 酚红 25mL 煮溶后调 ,冷却用大试管倾倒斜面保存。 7) 吕氏血清培养基: (分离白喉棒状杆菌用) %葡萄糖肉汤( )100mL (牛、羊、猪) 300mL 肉汤与动物血清混合,分装于无菌试管,每管 5mL ,在血清凝固器或流动蒸汽灭菌器内灭菌制成斜面。灭菌方法: 第一天: 80 0C1小时第二天: 85 0C1小时,于 37 0C过夜第三天: 90 0C1小时,于 37 0C过夜 8) 亚碲酸钾琼脂: (分离白喉棒状杆菌用) 肉汤琼脂 100mL 210% 葡萄糖肉液 2mL 31%亚碲酸钾溶液 % 胱氨酸水溶液 1mL 5脱纤维绵羊血 5~10mL 先将肉浸汤琼脂溶化后,待冷至 50 0C左右,无菌加入已灭菌的葡萄糖,亚碲酸钾和胱氨酸溶液、血液混匀后倾注平板。 9) 气管分泌物标本运送培养基( Transportation medium ) TSB 大豆培养基 3g葡萄糖 脱脂奶粉 2g甘油 10mL 蒸馏水 100mL 先将 1、2项加入温水中煮溶后,再加脱脂奶粉,摇匀,再煮沸,最后滴加甘油, 每管 - 分装进塑料