文档介绍：第一篇:菌种相关技能技能一显微技术实验操作一、显微技术的应用:,初步鉴定菌种种类;、科研工作中对操作的可靠性进行检测,如是否染菌。二、实验目的:掌握实验室显微镜的使用方法,能够根据实验需要运用各种染色方法进行鉴定。三、学习重点:观测样品的制备光学显微镜的使用常用染液的制备单染色法和革兰氏染色四、使用仪器超净工作台、载玻片(若干),去离子水,移液枪,灭菌枪头,接种环五、试剂结晶紫、酒精、草酸铵、蒸馏水(或去离子水)、碘、碘化钾、番红六、染色液配制结晶紫染色液:、酒精(95%)、,加入95%乙醇使之溶解,配成A液;将草酸铵溶于蒸馏水配成B液,两液混合后即成。卢哥氏碘液:、、。先将碘化钾溶解在一小部分的蒸馏水中,再将碘溶解在碘化钾溶液中,然后加入其余的蒸馏水即成。番红染液:、。七、染色步骤:(1)革兰氏染色法:涂片——干燥——固定(不能在火焰上烤)——染色(结晶紫1min)——水洗——镜检如果省去固定步骤,菌体的芽孢、荚膜一般都能看到(2)细菌的单染色法涂片——干燥——固定初染(结晶紫1滴,约1min)——水洗媒染(滴加碘液,覆盖1min)——水洗脱色(用95%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止)——水洗复染(用番红液染1-2min)——水洗镜检(干燥后,置油镜观察)阴性呈红色,阳性呈紫色。以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准,过于密集的细菌,常常呈假阳性。技能二PH计的使用一、实验目的:掌握PH计的标定方法(一点标定法、两点标定法)并学会不同PH标准缓冲液溶液的配制。二、实验原理:PH计是利用PH复合电极对被测溶液中不同的PH值产生的直流电位,通过PH前置放大器和测温传感器对被测溶液的温度测量信号叠加,并进行自动运算后输入到转换器,以达到PH值的数字显示。PH计经过标准缓冲液校准后,即可测量溶液的PH值。三、仪器PHS-3B精密级数字式酸度计100ml小烧杯三只玻璃棒洗瓶250ml容量瓶三只温度计一只四、试剂邻苯二甲酸氢钾、混合磷酸盐、四硼酸钠、去离子水标准PH缓冲液的配制1、,溶解后用250ml容量瓶定溶到250ml即可2、,溶解定容到250ml即可3、,溶解定容到250ml即可五、实验步骤仪器的预热〈1〉接通电源,把开关置于“开”的位置,预热10分钟。〈2〉温度补偿方法自动温度补偿法将仪器后侧的“选择开关”置于自动,把仪器的“PH-T-mV”置于“T”,数字显示即为测温传感器测得的温度,同时仪器将温度信号送入PH-T混合电路进行运算,从而起到PH自动补偿的目的。手动温度补偿法拔去温度传感器,将仪器后侧的“选择开关”置于手动。把仪器的“PH-T-mV”置于“T”,调节温度调节旋钮,使数字显示值与温度计显示数值相同,仪器将该温度信号送入PH-T混合电路进行运算,从而起到PH自动补偿的目的。仪器的标定<1>一点标定法:以手动温度补偿为例用去离子水清洗电极并用滤纸吸干,然后插入标准缓冲液中(PH==),将“PH-T-mV”旋钮置于“T”,调节温度旋钮使显示温度和标准液温度相同。将“PH-T-mV”旋钮置于“PH”,“斜率”旋钮顺时针旋足,调节“定位器”旋钮,使显示器数值和标准缓冲液在该温度下PH值(PH==)注:仪器一点标定结束后,此时“定位”旋钮不再变动。〈2〉两点标定法:以手动温度补偿为例用去离子水清洗电极并用滤纸吸干,然后插入PH=,将“PH-T-mV”旋钮置于“T”,调节温度旋钮使显示温度和标准液温度相同。将“PH-T-mV”旋钮置于“PH”,数字显示值为PH=。a)如果测量的缓冲溶液为酸性,将电极从PH=,用去离子水清洗,再用滤纸吸干,然后插入PH=,调节“斜率”旋钮,使数字显示值为该温度下PH=。b)如果测量的缓冲溶液为碱性,将电极从PH=,用去离子水清洗,再用滤纸吸干,然后插入PH=,调节“斜率”旋钮,使数字显示值为该温度下PH=。注:经校准“定位”旋钮和“斜率”旋钮的仪器,即可用来测量溶液PH值。此时“定位”旋钮和“斜率”旋钮不再变动。如果连续使用时,每天标定一次就可以了。常规测量可采用一点标定法,精确测量采用两点标定法。附:技能三培养基的配制一、实验目的1掌握不同培养基的配制方法2了解不同培养