文档介绍：第三章细胞生物学研究方法
★科学实验思路及模式生物
细胞形态结构的观察方法
细胞组分的分析方法
细胞培养、细胞工程与显微操作技术
本章要点:
1 了解主要工具和常用方法,侧重掌握基本原理和基本应用;
2 认识工具和方法与学科发展的相关性。
进行初步观察
形成可验证的假说
设计对照试验
收集资料
解释结果
作出合理结论
查阅已
有知识
科学研究的一般思路和程序
☆生物学研究模式生物
非洲爪蟾
拟南芥实验
线虫实验
酵母(5)
大小鼠实验
果蝇实验
小鼠转基因
☆不同物种享有共同分子机制
如何学习细胞生物学?
抽象思维与动态观点
结构与功能统一的观点
同一性(unity)和多样性(diversity)的问题
细胞生物学的主要内容:
结构与功能(动态特征);
细胞的生命活动;
实验科学与实验技术——细胞真知源于实验室
——What we know//How we know.
第一节细胞形态结构的观察方法
光学显微镜技术(light microscopy)
电子显微镜技术(Electro microscopy)
扫描探针显微镜(Scanning Probe Microscope)
扫描遂道显微镜(scanning tunneling microscope )
第二节细胞组分的分析方法
离心分离技术
细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法
特异蛋白抗原的定位与定性
细胞内特异核酸的定位与定性
放射自显影技术
定量细胞化学分析技术
核酸分子杂交技术
第三节细胞培养、细胞工程与显微操作技术
细胞的培养
细胞工程
一、光学显微镜技术(light microscopy)
普通复式光学显微镜技术
荧光显微镜技术(Fluorescence Microscopy)
暗视野显微镜(darkfield microscope)
相差显微镜(phase-contrast microscope)
倒置显微镜
激光共焦扫描显微镜技术(Laser Confocal Microscopy) 微分干涉显微镜
(differential interference contrast microscope, DIC)
录像增差显微镜技术(video-enhance microscopy)
二、电子显微镜技术
电镜与光镜的比较
电镜与光镜光路图比较
电镜的设计原理及分类
电子显微镜的基本构造
主要电镜制样技术
超薄切片技术
负染色技术
冰冻蚀刻技术
电镜三维重构技术
☆扫描电镜(Scanning electron microscope,SEM) 核酸大分子制样技术
电镜显微放射自显影
电镜整装细胞制片技术
扫描遂道显微镜
Scanning Probe Microscope,SPM
(80年代发展起来的检测样品微观结构的仪器)
包括:STM、AFM、磁力显微镜、摩擦力显微镜等
原理:扫描探针与样品接触或达到很近距离时,即产生彼此间相互作用力,如
量子力学中的隧道效应(隧道电流)、原子间作用力、磁力、摩擦力等,
并在计算机显示出来,从而反映出样品表面形貌信息、电特性或磁特性等。
装置:扫描的压电陶瓷,逼近装置,电子学反馈控制系统和数据采集、处理、显示系统。
特点:(1)可对晶体或非晶体成像,无需复杂计算,且分辨本领高。
(~,);
(2)可实时得到样品表面三维图象,可测量厚度信息;
(3)可在真空、大气、液体等多种条件下工作;非破坏性测量。
(4)可连续成像,进行动态观察
用途:纳米生物学研究领域中的重要工具,在原子水平上揭示样本表面的结构。