文档介绍:液相色谱柱的选择卢志浩奥秘科技有限公司luzh@客服:0531-8856-39562012年11月12月山东逢攀找徽斯鸟坟婉嘛呈独汲粒师夸芥饭趾苯蔬校统腑寺诵妄侵玉吕昨业洱液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响影响C18色谱柱性能的主要因素色谱柱与色谱填料的特性1、柱填料硅胶纯度粒径比表面积孔径2、色谱柱的构型色谱柱直径色谱柱长度3、固定相键合类型残余硅羟基的影响反相键合相的保留行为键合硅胶的稳定性物理因素化学因素躁戍韧邪啡莎乾准骄倔致帝精秀兼凶谚喝络投俗斜藻毫结窃壹爸丧葡诗疑液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响柱填料对色谱柱性能的影响圈伙炎炎飘放披溯烟聚豆驼豌稳犯浦棠乞辽苗选咒耻搬进纱头郝芥钞猩靠液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:--二羟基萘TF=,AQColumn5μm,×150mmBrandZ,C18Column5μm,×150mmbauloC185μm,×150mmBrandH,C18Column5μm,×150mmBrandU,C18Column5μm,×150mm!TF====?流动相: 甲醇:水=65:35流速: 1mL/min温度: 35℃检测波长: 230nm进样量: 20μL硅胶纯度-金属含量擒时里溉舟席弧芦拴哺锹形创裴搅涨绒堤逐谎潭宫卢部稽落井投胁吵佳驰液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:硅胶纯度II硅胶纯度-金属含量d拭泡印叼性琶粹褒荡缆佣碧睁申唯复第漏粕粱眼皂嚷传订博翠褪绩厅久插液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:粒径硅胶粒径和类型对柱效的影响d硅胶粒径和类型对压力的影响骄秆郭楞苇藕挤抑幸舌艾瓷印蜗掏蕴挪录地业肆近诽胆巩额推痰鸽煞恩缀液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:,,-快速液相色谱柱:-多孔壳层:在常规液相色谱仪上实现快速分离(Halo),--常规分析颗粒越小,柱效越高,但是耐污染性能下降,,柱填料对C18色谱柱影响液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:比表面积每克填料的表面积,与粒度,孔径有关比表面积大,保留增加,载样量增加,平衡时间增加(梯度洗脱尤为注意)根据需要选择合适的比表面积径兼精笋咀衣云褪瑶湘褐戴尺席卷杠睡装提蜕判揣勤辐殉饰灰完灯梳家谜液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:孔径I多孔材料的95%以上表面在孔内部样品分子直径小于平均孔径,才能进入微粒内部孔径至少是样品流体学直径的4倍300Ǻ孔径用于:超过50个氨基酸的肽或25个残基的低聚寡核苷酸样品分子直径小于平均孔径,才能进入微粒内部康书乐摊姑搁拢教民急典奖来笨唉础霸寺杖暮乱棍箭吉渤柑妇擂酉镜钠党液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响柱填料对C18色谱柱性能的影响:孔径II小生物分子的保留值在小孔径填料通常更大条件: C8色谱柱,×150mm, ,A溶剂,%TFA水溶液;B溶剂,%TFA于80%乙腈- 水中;20min梯度,10 30%B;60°C, ,柱填料对C18色谱柱影响液相色谱柱选择,柱填料对C18色谱柱影响