文档介绍：郑州大学 2 0 0 9 届硕士学位论文中文摘要以奥沙利铂、顺铂为主的联合用药诱导胃癌细胞凋亡的实验研究研究生常方方导师周云樊青霞郑州大学第一附属医院肿瘤科郑州 4 5 0 0 5 2 摘要背景与目的胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一, 化疗是胃癌尤其是进展期胃癌综合治疗中必不可少的组成部分。但由于胃癌对化疗药物有天然耐药性, 方面的研究, 的联合用药、以提高药物的疗效, 减轻药物对正常组织的毒性, 研究者开展了多如如何科学合理选择更优化的联合方式及给药途径, 以及靶向治疗的研究等, 并不断取得了新的进展。铂类是细胞周期非特异性抗癌药物, 类似双功能烷化剂, D N A 是其作用靶点; 在低氯环境中解离, 与 D N A 等生物大分子结合形成链内交联、链间交联、 D N A 一蛋白质分子间交联, 从而使 D N A 链局部纽结或解旋, 阻止 D N A 聚合酶推进, 致使 D N A 复制、转录失败, 造成肿瘤细胞死亡。自从发现顺铂具有抑制肿瘤细胞增长的活性以来, 铂类药物在肿瘤化疗中的研究与临床应用取得了迅速的进展, 现己成为目前临床上不可或缺的一线化疗药物。目前, 国内常用的铂类药物有顺铂( e i s p l a t i n , D D p ) 、卡铂( e a r b o p l a t i n , C B p ) 和奥沙利铂( o x a l i p l a t i n , O X A ) 。顺铂严重的耳肾毒性使其临床剂量受到一定限制, 从而影响疗效, 为了开发高效低毒的新型铂类抗癌药物, 研究者用 1 , 2 一二氨基环己烷( D A c H ) 基团替代顺铂( C D D P ) N H 4 的氨基则产生奥沙利铂。奥沙利铂作用机制与顺铂相似, 抗肿瘤活性优于顺铂, 对耐顺铂的肿瘤细胞亦有作用。奥沙利铂主要剂量限制性毒性是外周神经毒性, 无耳肾毒性, 与顺铂毒副作用不叠加, 值得进一步研究探讨二者联合应用以起到增效减毒的临床疗效。郑州大学 2 0 0 9 届硕士学位论文中文摘要目前铂类药物联合应用主要集中在顺铂、卡铂联合治疗胃癌、食管癌、肺癌、卵巢癌等; 也有报道顺铂、奥沙利铂联合应用治疗卵巢癌、食管癌、责门癌、生殖细胞肿瘤有协同作用, 但涉及到顺铂、奥沙利铂静脉联合应用治疗胃癌的临床和基础研究很少。 D D P 、 O X A 、 5 一 F U 是临床胃癌化疗方案中的常用药物, P F 方案是胃癌一线基础治疗方案, 但是药物毒性限制了铂类临床大剂量应用。本研究以多种实验方法观察以 D D P 、 O X A 为主联合用药对胃癌细胞体外的抑瘤活性和诱导凋亡能力, 以及联合用药价值, 为开发高效低毒的临床化疗方案提供科学的实验依据。材料与方法: 1 . 细胞: 人胃癌细胞系 B G C 一 8 2 3 。 2 . 实验药物: 奥沙利铂( o x a l i p l a t i n , O x A ) 、顺铂( e i s 一 d i s m i n e d i e h o r o p l a t i n u m , D D P ) 、 5 一氟尿心睫( 5 一 f l u o r o u r a e i l , 5 · F U ) 。 3 . M T T 比色法测定不同浓度的单药及联合用药处理后细胞的生长抑制率, 并绘制生长曲线。 4 . 流式细胞仪检测细胞的周期分布。 5 . 免疫组化测定凋亡相关基因 B c l 一 2 、 B a x 、 C a s p a s e 一 3 蛋白表达。 6 . 统计学处理: 采用 s P s s l 3 . o 统计软件, 数据用均数士标准差( x 士 s ) 表示, 计量资料符合正态性, 方差齐时多组间比较采用单因素方差分析( o n e 一 w a y A N O V A ) , 相同处理组前后的比较用配对 t 检验; P 毛 0 . 0 5 具有显著性。结果: 1 . 不同浓度的 O X A 单药作用 4 8 h 后, 胃癌细胞生长受到不同程度的抑制, 所有实验组与对照组及不同浓度实验组之间 O D 值比较有显著差异( P < 0 . 0 5 ) 。结果显示, O X A 单药可有效抑制胃癌细胞的生长, 呈剂量依赖性。 2 . 不同浓度的 O X A 、 D D P 联合用药作用于胃癌细胞, 所有实验组与对照组及各实验组之间 O D 值比较有显著差异( P < 0 . 0 5 ) 。实验结果表明, O X A 与 D D P 联合用药可有效抑制胃癌细胞的生长, 呈剂量依赖性。 O X A 联合 D D P 作用胃癌细胞 4 8 h 后对细胞生长抑制率较 O X A 单药组增高, O X A 的 I C S 。值下降。 3 . 不同浓度的 O X A 、 D D P 、 5 一