文档介绍:第三军医大学硕士学位论文大鼠脊髓完全性损伤后神经源性膀胱的研究——光感基因治疗的前期研究摘要目的:本研究拟行膀胱逼尿肌逆行示踪,观察腰骶髓切片,明确骶副交感神经核(SPN)位置,以准确造成骶上脊髓损伤和骶髓损伤实验动物模型,并为下一步实验光感基因的准确导入骶髓内骶副交感神经核(SPN)奠定了基础。同时观察不同节段骶神经后根是否存在阳性纤维,从而定位需要切断的骶神经后根,避免引起骶段其他感觉和反射的丧失。为光感基因转染入骶髓内骶副交感神经核(SPN)并联合骶神经后根切断去传入治疗骶上脊髓损伤打下基础。方法:,。随后灌注固定,取材,切片,组织化学反应,显微镜观察。根据逆行示踪的结果,明确了支配膀胱逼尿肌的骶髓低位中枢——骶副交感神经核(SPN)的位置,且进行骨性标志定位,确保了损伤节段的选取无误;同时明确了大鼠膀胱传入神经的主要聚集区。随后即进行骶上脊髓损伤及骶髓损伤,以及骶上脊髓损伤联合切断主要的膀胱传入神经, 观察大鼠膀胱形态学及尿流动力学变化。结果:,组织切片,四***联苯***(TMB) 法呈色,在显微镜下观察,结果显示:膀胱的初级传出神经元在脊髓的分布是脊髓L6部至S1侧角(以L6多见)可见HRP神经元、脊髓L6和S1节段Ⅶ层外侧部,即灰质外侧缘的外侧带,又称骶髓副交感核(SPN)。(DRG)中,。骶上脊髓损伤组膀胱最大容量较正常对照组减少、逼尿肌漏尿点压较正常对照组明显升高,因此表现为低顺应性膀胱;骶髓损伤组膀胱最大容量较正常对照组增加、逼尿肌漏尿点压较对照组明显下降, 因此表现为高顺应性膀胱;骶上脊髓损伤联合双侧L6、SI后根切断组膀胱最大容量较正常对照组增加、逼尿肌漏尿点压较正常对照组也升高,计算后表现为膀胱顺应性较高。结论:根据本次实验结果,明确了支配膀胱逼尿肌的低位中枢——骶副交感神经核(SPN)的位置,以准确造成骶上脊髓损伤和骶髓损伤实验动物模型,同时为下一步实验光感基因的准确导入奠定了基础。明确了膀胱传入神经的主要部分,定位需要切断的 4 第三军医大学硕士学位论文骶神经后根,尽最大可能避免引起骶段其他感觉和反射的丧失。并根据尿流动力学结果验证了其可行性。不同节段脊髓损伤后的尿流动力学表现为下一步实验观察光感基因治疗后是否有效确定了比较的基线。关键词:脊髓损伤;神经源性膀胱;逆行示踪;骶神经后根切断去传入 5 第三军医大学硕士学位论文 Experimental study ofneurogenic bladder resulted plete spinal cord ln l l l study ic therapy Abstract Objective:This study underwent detrusor retrograde tracer toobserve thelumbosacral spinal cordslice,clear thesacralparasympathetic nucleus(SPN)position,accurate cause of super-sacral spinal cordinjury and sacralspinalcord埘uD,in experimental animal models. Observation ofthedifferentsegments ofthesacralnerve root ifthere arepositive fibers, thereby positioning the need tocutoff thesacral nerve roots,to avoidany lossoffeeling and reflection thefoundation forsubsequent experiments. Methods:the ratbladder wallinjection ofWGA—HRP,continuing tosurvive for 48hours afterWGA—HRP injection perfusion—fixed,drawing,sliced,histochemical reaction totheresults ofretrogradetracing,clear the sacrallowcenter-the location oftheurinary bladder de