文档介绍：Applications on Optical Biosensors based on Gold Nanoparticles by JINPeiyan .(Xinyang Normal University)2008 Athesissubmitted inpartial satisfaction of the Requirements forthedegree of Mastor ofScience Analytical Chemistry theGraduate School of Hunan University Supervisor Professor Chu Xia May,2011 吣4 ㈣0 ㈣0 m9 mY 湖南大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:金壤藁日期:2011年 G月3 El 学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于1、保密口,在年解密后适用本授权书。 2、不保密团。(请在以上相应方框内打“√”) 作者签名:金培纂. 日期:为11年 6月3 日导师签名:--z誓/驴日期:≯7/年名月弓日云!弘己 7 硕士学位论文摘要光学生物传感是以光学信号选择性表达来检测体系化学、生物组分的应用技术,建立在光谱化学和光学波导与量测技术基础上的将分析对象的化学信息以吸收、反射、荧光或化学发光、折射、散射等光学性质表达的传感装置则构成了相应的光学生物传感器。光学生物传感器因其快速、灵敏、准确和高选择性等特点而得到广泛应用。纳米金颗粒是近些年着重研究的纳米材料,除了拥有表面效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应等纳米材料的特征性质外,它优异的光学性质、电学性质以及良好的生物兼容性使其在生化分析中得到广泛应用,在基因调控、药物筛选、小分子以及蛋白质检测等方面的应用已有成熟研究。本论文即为基于纳米金而构建相应的光学生物传感器来实现对分析物的简单、快速、准确检测。 。特异结合蛋白能够与它的识别位点发生特异的结合作用,我们选择TATA结合蛋白作为目标蛋白,将两条单链分别标记在纳米金上,它们的杂交互补序列含有TATA结合蛋白的识别位点。杂交引起的纳米金体系由红色变成紫色的颜色变化在外切酶III(Exo III)酶切下恢复为红色,而目标蛋白存在时,会与杂交部位的识别位点结合,阻止Exo III对杂交的纳米金团聚体的酶切,体系仍为紫色,据此而实现对TATA结合蛋白的检测。结果表明,该传感器能够实现对TATA结合蛋白的灵敏检测,线性检测范围为0到120 nM,检测下限为10 nM。 (SERS)的不同增强效果而实现对分析物的检测。单链DNA(ssDNA)分子在纳米金表面有较高的吸附属性,能够保护纳米金颗粒使其在一定盐离子浓度下不会发生团聚,而双链DNA(dsDNA)却无此特性。当目标物存在时,与ssDNA作用,形成dsDNA 或发夹结构,离开纳米金表面,此时纳米金在盐离子存在下就发生团聚。纳米金在分散和团聚的不同状态下对SERS的增强效应不同,我们以此来实现对DNA、 H92+的检测。实验结果表明,该方法能够用来实现对DNA、H92+的检测,对DNA 体系,其检测范围为50到300 nM,检测限为75 nM;对H92+的体系,,检测限为8 nM。 。将末端修饰有荧光基团的多肽链标记在纳米金上,,因为纳米金的猝灭作用,体系的荧光值很小,,它与纳米金上的多肽链 H 基于纳米金的光学生物传感器的应用作用,被酶切下的有荧光基团的末端部分远离纳米金表面,荧光值随之恢复,据此而实现对Caspase-3的体外检测。结果显示,, gg/pL,。把该方法应用于活细胞内Caspas