文档介绍：1 人骨钙素(OC)酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中骨钙素(OC)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人骨钙素(OC)水平。用纯化的人骨钙素(OC)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入骨钙素(OC),再与 HRP 标记的骨钙素(OC)抗体结合,形成抗体- 抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的骨钙素(OC)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中人骨钙素(OC)浓度。试剂盒组成: 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置保存说明书 1 份 1 份封板膜 2 片( 48 ) 2 片( 96 ) 密封袋 1 个 1 个酶标包被板 1 × 48 1 × 96 2-8 ℃保存标准品: 1350ng/L × 1 瓶 × 1 瓶 2-8 ℃保存标准品稀释液 × 1 瓶 × 1 瓶 2-8 ℃保存酶标试剂 3 ml × 1 瓶 6 ml × 1 瓶 2-8 ℃保存样品稀释液 3 ml × 1 瓶 6 ml × 1 瓶 2-8 ℃保存显色剂 A 液 3 ml × 1 瓶 6 ml × 1 瓶 2-8 ℃保存显色剂 B 液 3 ml × 1 瓶 6 ml × 1 瓶 2-8 ℃保存终止液 3ml × 1 瓶 6ml × 1 瓶 2-8 ℃保存浓缩洗涤液( 20ml × 20 倍)× 1 瓶( 20ml × 30 倍)× 1 瓶 2-8 ℃保存样本处理及要求: 1. 血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2. 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3. 尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右( 2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS ( - )稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 2 5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS , 。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8 ℃的温度。加入一定量的 PBS ( ),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标