文档介绍：实验报告实验名称多克隆抗体的制备一(抗血清制备)实验日期院系专业班级姓名学号一、实验目的了解免疫的原理,掌握免疫方法和抗血清的制备技术。二、实验器材试剂:酒精棉球、NDV灭活油乳剂疫苗、麻醉剂器材:兔笼、注射器、剃毛剪、手术刀、止血钳、手术剪(组织剪、眼科剪)、动脉夹、眼科剪、动脉导管、纱布、棉线、细线、培养箱、冰箱、结扎细线、离心机、温箱三、。一种抗原能否引发抗体反应,一方面取决于抗原分子表面有无特异性的化学结构——抗原决定簇,另一方面取决于机体有无相应的免疫活性细胞。,抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。抗原进入机体经过一定的潜伏期,抗体效价逐步上升,达到高峰后,能维持一短暂的时期,以后又逐渐下降,但当第二次接触相同的抗原时,抗体的上升较前次为快,高峰时的效价也比前次为高。抗体持续的时间也较长,此也称为再次反应。待动物血清中存在大量抗体时,采集动物血液,分离析出血清,便得到所需的抗血清(免疫血清或抗体)。,可以刺激机体产生多种抗体形成细胞克隆,合成和分泌各种抗原决定簇的抗体,免疫血清中实际上是含有多种抗体的混合物,所以这种免疫法获得的免疫血清又称为多克隆抗体。,为了获得特异性强,效价高的抗血清,除了抗原的因素外,还需注意动物品系的选择、抗原注射的浓度、剂量、次数、间隔时间及注射途径等。对于免疫原性较弱的可溶性抗原(如蛋白质类抗原)要加入佐剂,以增强免疫性。四、)取一只健康大白兔固定在兔笼中2)酒精消毒大白兔皮肤后,通过皮下或皮内注射方式接种大白兔,共计注射8-10个位置,。3)为提高免疫血清效价,通常需要进行2-3次加强免疫,每次免疫间隔10-15天。然后再接免疫结束后的血清采集过程。4)注射完毕,将大白兔从兔台取下,放回饲养笼。)取一只接种过的大白兔固定于兔笼,耳缘静脉注射合适剂量的麻醉剂麻醉。将麻醉后的大白兔固定于兔台,用棉线固定四肢,细线固定门牙于铁柱,使颈部完全暴露。2)用剃毛剪贴着皮肤减去颈部的毛,手术刀在颈部中央切开皮肤约3-4cm,纱布吸去多余的血液。用止血钳提拉住两边的皮毛,组织剪将切口扩大至7-8cm。分别剪开黏膜层、肌肉层,用止血钳扩大开口使之与皮肤一致,游离出颈动脉约2-3cm。3)用结扎细线2根穿过颈动脉,远心端结扎,近心端备用。动脉夹夹住颈动脉近心端,用眼科镊手柄处将颈动脉抬起,然后用眼科剪斜向近心端剪开血管,插入动脉导管,两端