文档介绍：中央民族大学生命与环境科学学院生物化学综合性设计实验报告一种简便快捷提取小白鼠肝脏DNA的方法OneasimpleandconvenientMethodsofGenomeDNAExtractionofmouse姓名:吕梦春学号:1143021年级:2011级专业:生物科学类小组成员:张星瑶指导教师:王斌2012年12月一种简便快捷提取小白鼠肝脏DNA的方法吕梦春中央民族大学生命与环境科学学院北京100081)摘要:主要运用了盐洗法提取小白鼠肝脏的基因组DNA,利用分光光度计测定其OD260与OD280的吸光值,计算比率估计核酸的纯度,并利用琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段在凝胶中的位置,,用盐析法提取的DNA纯度较高。是一种简单高效的提取动物肝脏的方法。关键词:小白鼠;DNA提取;琼脂糖凝胶电泳OneasimpleandconvenientMethodsofGenomeDNAExtractionofmouseMeng-chunLv(MINZUuniversityofchina,BEIJING,100081)Abstract:ThegenomeDNAsofmousewereextractedwith.ThentherationofOD260andOD280wasdeterminedbyultravioletspectrophotometer.ThepurityofthenucleicacidwascalculatedandthepositionofDNAsegmentsinthegelwasobservedbyagarsugargelelectrophoresisFinally,themethodswasshowedasimple,convenient,:mouse;genomeDNAs;agarsugargelelectrophoresis;20世纪50年代初,、分子生物学和遗传学的发展以及基因工程等生物技术的创立,,还是蛋白质工程,首先都需要从生物体中提取基因组DNA(genomicDNA),所以DNA的分离提取在分子生物学以及相关学科的研究中是一个非常重要的步骤,、,,国内外已有多种提取DNA的方法,如水煮法、酚抽提法、甲酰胺解聚法、盐酸胍裂解法、,虽然有人对其进行过比较,但究竟哪一种方法更适用于普遍意义上的DNA提取,,是一种简便、快捷、(盐析法)的原理和方法;掌握测定核酸DNA的原理和方法;掌握核酸DNA的琼脂糖电泳的原理和方法;(植物、动物、微生物)的基因组DNA的提取方法有所不同;不同种类或同一种类的不同组织因其细胞结构及所含的成分不同,分离方法也有差异。在提取某种特殊组织的DNA时必须参照文献和经验建立相应的提取方法,以获得可用的DNA大分子。尤其是组织中的多糖和酶类物质对随后的酶切、PCR反应等有较强的抑制作用,因此用富含这类物质的材料提取基因组DNA时,应考虑除去多糖和酚类物质。本次试验中,主要利用不同浓度的NaCl溶液,,-异戊醇将蛋白质沉淀除去,,,提取时加入EDTA(乙二胺四乙酸),分解RNA。,核酸样品的纯度可用紫外分光光度法进行测定、读出260nm与280nm的吸光度(A)即光密度(OD)值,从A260/A280的比值即可判断样品的纯度。纯DNA的A260/,,A260/A280比值即明显降低。不纯的样品不能用紫外吸收法做定量测定。对于纯的样品,只要读出260nm的A值即可算出其含量。通常以A值为1相当于50μg/ml双螺旋DNA,或40μg/ml单链DNA(或RNA),或20μg/ml寡核苷酸计算。这个方法既快速又相当准确,而且不会浪费样品。