[生物工程] PCR技术在寄生虫学研究上的应用概述.doc

文档介绍：PCR技术在寄生虫学研究上的应用概述
【摘要】近年来,越来越多的分子生物学技术应用到寄生虫学与寄生虫病学研究领域,PCR技术因其敏感性高、特异性强等优点得到了广泛应用。目前,寄生虫病在我国有逐渐流行的趋势,分子生物学的发展及其在寄生虫学上的应用无疑对寄生虫病的诊断、防制起到十分重要的作用,本文就PCR技术的最新研究进展及其在寄生虫学方面的应用作一介绍。
【关键词】 PCR技术;寄生虫;分子生物学技术
PCR technology in parasitology YAN Chao,ZHAO Guang-hui,ZHU Xing-quan. College of Veterinary Medicine,South China Agricultural University,Guangzhou 510642
【Abstract】 In recent years, more and more molecular biological technologies have been applied to the field of parasitology. In particular, polymerase chain reaction (PCR)-coupled approaches have found broad applicability because of their high sensitivity and specificity. And in recent years, parasitic diseases have e more pandemic and serious, however, molecular biological technologies can play an important role in the diagnosis, prevention and control of parasitic diseases of human and animals. The present article briefly reviews some developments and applications of the PCR technology in parasitology.
【key words】 PCR technology;Parasite;Molecular biological technology
近年来,寄生虫病流行日趋猖獗,严重威胁人类健康,也给畜牧业发展带来了巨大损失。寄生虫病的流行促使人们寻找新的、快速准确的工具进行诊断防制。自1985年Kerry Mulls创立DNA聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术以来,它已成为分子生物学领域最常用的方法之一。PCR技术是一项体外基因快速扩增技术,由于其特异性好、灵敏度高等优点,已迅速而广泛地应用于寄生虫学与寄生虫病学研究领域。特别是近几年来,随着分子生物学技术的不断发展,新PCR技术不断涌现,而旧PCR技术也在不断改良,这为寄生虫病的诊断、防制提供了有力工具。鉴于此,笔者对近几年来以PCR技术为基础的分子生物学检测和鉴定方法在寄生虫学上的应用做一综述。
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1 分子遗传标记
广义的分子遗传标记是指可遗传并可检测的DNA序列或蛋白质。狭义的分子遗传标记是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异性DNA片段。随着分子遗传标记的不断发展,核糖体DNA(rDNA)的内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS )、线粒体DNA(mtDNA)和可变数量简单重复序列(variable number tandem repeats,VNTR)等遗传标记为寄生虫学家进行寄生虫种属鉴定、系统发育与进化研究、遗传多样性分析、分子分类乃至于其抗药性等提供了理想标记。
核糖体DNA
真核生物的rDNA是一个由许多重复序列(通常数百)串联组成的庞大的多基因家族,通常成团状聚集在特异性染色体中。rDNA通常是由编码小亚基rRNA基因(如18S)和大亚基rRNA基因(如28S)的基因串联而成,两个大小亚基之间存在间隔区序列,它包括两个内部转录间隔区(ITS-1和ITS-2) rRNA基因。由于ITS区不加入成熟核糖体,所以受到的选择压力较小,进化速率较快,加之基因通过不等价交换(unequal crossing-over)和基因转变(gene conversion)等方式而经历快速的协同演化(concerted evolution) [1,2],从而导致了重复单位在不同基因组中的一致性,即具