文档介绍：博士学位论文重庆医科大学成年大鼠骨髓问充质干细胞可塑性的体外鲤塞舒畅李廷玉教授重庆医科大学附属儿童医院儿科学博士年分类号:墅:——密级:沦文题目作者姓名指导教师姓名俺啤⒌ノ幻申请学位级别学科、专业名称论文答辩年月
指导教峰签名:~坦⋯.学位论文作者签名:厘壹里垄向物日期:型旦里重庆医科大学研究生学位论文独创性声明学位论文版权使用授权书掣瞨凡本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研论文作者签名究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阕。学校可以公布学位论文的全部或部分内容C苣谌莩,可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。≥,
英汉缩略语名词对照英文缩写英文全称中文译文巧ò全反式视黄酸碱性成纤维母细胞生长因子丁羟基茴香醚牛血清白蛋白囊性纤维化跨膜转导调节细胞角蛋白二氨基连苯嗡二脒基苯基吲哚二乙基焦磷酰胺蒸馏水改良的养基二甲基亚砜二硫苏糖醇溴化乙啶乙二胺四乙酸上皮钠通道胎牛血清短路电流莫洛尼鼠白血病病毒≈因子重庆医科大学博士研究生学位论文籋—‘,籨ぁ’
改良神经元诱导液非必需氨基酸神经微丝乙基苯基聚乙二醇神经元特异性烯醇化酶青链霉素磷酸盐缓冲液多聚酶链反应多聚甲醛苯甲基磺酰氟大鼠骨髓干细胞逆转录十二烷基硫酸钠无特殊病原体四甲基乙二胺三羟甲基氨基甲烷闭锁小带重庆医科大学博士研究生学位论文—疭
成年大鼠骨髓间充质干细胞可塑性的体外研究摘要第一部分骨髓间充质干细胞的多向分化潜能第一章体外诱导成年大鼠骨髓问充质干细胞分化为巧ò访舾行陨窬目的:体外诱导成年大鼠骨髓问充质干细胞分化为具有神经元表型和部分功能的细胞。方法:将取自艹赡闟笫蠊伞㈦止堑南赴诖ù嘌捎糜邢尴∈头ǘ韵赴鞯タ寺〈炕T谌ǚ词绞踊扑嵩び导小时后,洗去含血清培养液,换用改良的な程神经元诱导液培养细胞,、∈焙笙晕镜下观察细胞形态变化;细胞免疫染色检测神经元标志物神经元特异性烯醇化酶、神经丝一羟色胺的表达;并用胞内钙代谢测定法测定诱导前后细胞对的功能反应。结果:改良神经元诱导液处理∈焙螅赴J急硐稚窬5形态特征,细胞折光性增强,形成收缩的双极或多极胞体和细长突起。细胞可以维持神经元样存活小时以上。诱导∈焙螅悦庖呷旧课题来源:国家自然科学基金项目资助重庆医科大学博士研究生学位论文
第二章体外诱导成年大鼠骨髓干细胞分化为上皮样细胞的细胞用进行复染,..サ南赴泶锷窬L匾煨韵┐蓟酶。诱导小时后,..,且免疫组化证实巧ò芴逶诟上赴媳泶镂⑷酰诜只后的神经元中表达较强。结论:本实验从形态、细胞标志物、功能几方面显示煞化为巧ò访舾行陨窬!关键词:分化,评胱樱撬栉食渲矢上赴窬目的:将已成功诱导为敏感性神经元的单克隆糜极性上皮细胞生长的渗透性滤膜上观察其向上皮细胞方向分化情况。方法:取同一单克隆来源的凑×、的湿化孵箱中培养臁=ò胪改ど舷赴接镜下观察或苏木素染色冰冻切片观察细胞形态变化;免疫荧光染色、检测细胞标志物在不同水平的表达情况;短路电流检测细胞的电生理特性。、重庆医科大学博士研究生学位论文
第二部分丛吹纳窬:蜕掀ぱ赴梢酝过去分化和再分化途径相互转变结果:苏木素染色显示谏び谏感月四ど天后形成了紧密的单层。免疫荧光染色显示此生长在渗透性滤膜上的单层细胞表达上皮细胞标志物细胞角蛋白峁蚕允旧ぴ谏性滤膜而不是生长在培养瓶中的泶锷掀つ仆ǖ⒛性纤维跨膜转导调节子和紧密联结蛋白。膍5是,用仅检测到—谋泶铩6搪返缌鞑舛ǚㄏ允生长在渗透性滤膜上的丛聪赴ゲ愕牡缱栉,但对和的激动剂或阻断剂无反应。结论:极性上皮细胞生长的培养条件能诱导蛏掀ぱ赴分化。这些上皮样细胞表现上皮细胞形态,表达部分上皮细胞标志物,但不具有成熟上皮细胞离子通道的功能。关键词:骨髓干细胞,上皮细胞,渗透性支持,分化目的:首先从功能上证实丛吹纳窬?梢员挥盏既シ只增殖和再分化,然后研究干细胞来源的神经元和上皮前体细胞能否在所建立的体外培养诱导条件下通过去分化再分化实现相互转变。方法:在诱导只I窬∈焙螅挥煤G迮嘌液,再过小时后,按照个细胞/的密度转移至渗透性重庆医科大学博士研究生学