文档介绍：学****重点?了解染色的基本原理。?掌握常用染料的性质及其染液的配制技术。?掌握常用试剂、缓冲溶液、物质的量浓度的配制技术。?了解培养基的种类及一些常见培养基的用途, 掌握一般培养基的配制技术。一、染料的种类染料可按其电离后染料离子所带电荷的性质,分为?酸性染料(如伊红、刚果红、藻红、苯***黑、苦味酸等) ?碱性染料(如美蓝、***紫、结晶紫、碱性复红、中性红、孔雀绿和番红等。) ?中性(复合)染料?单纯染料第一节染料及染液配制技术第一节染料及染液配制技术二、染料的使用条件?酸性染料:当培养基因糖类分解产酸使 pH 下降时,细菌所带的正电荷增加,这时选择酸性染料, 易被染色。?碱性染料: 菌体蛋白质电离后带负电荷,而碱性染料电离时染料离子带正电荷。因此,带负电荷的细菌常和带正电荷的碱性染料进行结合。所以,在细菌学上常用碱性染料进行染色。第二节常用试剂的配制技术(一)缓冲液的配制技术在微生物检测过程中,许多化学反应必须在一定的 pH范围内进行,为了保证反应的完成,需要寻找和使用各种能对体系酸度起稳定作用的物质来控制不同体系的 pH。凡是能使溶液 pH控制并稳定在一定的范围之内,当有少量的酸或碱加入溶液时,仍能控制溶液的 pH不发生显著变化的试剂称为缓冲溶液。(一)缓冲液的配制技术 1 .磷酸缓冲液的配制 2 .醋酸缓冲液的配制 3 .柠檬酸一磷酸盐缓冲液的配制 4 . 1 mol/L Tris 缓冲液 5 . 缓冲液(二)物质的量浓度溶液的配制技术溶液浓度表示法?(1)物质的量浓度( mol / L ) 在生化和微生物实验中还常用 mmol / L 和μ mol / L 表示溶液的浓度。?(2)质量浓度( kg / L ) ?(3)质量摩尔浓度( mol / kg ) (二)物质的量浓度溶液的配制技术?物质的量浓度溶液的配制方法物质的量浓度要求的精确度为 1/l00 。配制时溶质称量需用 1/l000 的天平,溶剂体积要用容量瓶定量。(二)物质的量浓度溶液的配制技术?溶液浓度的调整(1)溶液稀释法即将已知浓度的浓溶液稀释成所需要某浓度的溶液。根据浓度与体积成反比的原理进行计算配制: C1 x V1 = C2 x V2 C1 ——浓溶液浓度; V1 ——浓溶液体积; C1 ——稀溶液浓度; V1 ——稀溶液体积; (二)物质的量浓度溶液的配制技术交叉法计算?设 a 为高浓度溶液的浓度, b 为低浓度溶液(或水)的浓度, c为所需溶液的浓度, 应用交叉法: a b ( c – b = x ) c x y ( a – c = y ) x= 所需 a 的体积, y= 所需 b 的体积。