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上传人:taotao0c 2020/8/16 文件大小:302 KB

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文档介绍

文档介绍:食品专业毕业论文————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期: 题目:重组乙醛脱氢酶的分离纯化及其酶学性质研究姓名:学院:专业:班级:学号:指导教师:职称:目录摘要 1关键词 1Abstract 1Keywords 1引言 11材料与方法 32结果与分析 73讨论 8致谢 9参考文献: 9重组乙醛脱氢酶的分离纯化及其酶学性质研究摘要:【目的】(DE3)/pET32a-istALDH产乙醛脱氢酶的纯化和酶学性质。【方法】工程菌经过IPTG诱导后产生乙醛脱氢酶,通过Ni-NTA亲和层析纯化,得到纯度较高的酶蛋白,并对纯酶进行了酶学性质及动力学研究。【结果】酶最终被纯化了9倍,并达到电泳纯。经过SDS-PAGE测得该酶的分子量约为57kDa。以乙醛为底物,酶促反应的最适温度为40℃,,热稳定性和酸碱稳定性相对较差;金属离子K+、Li+、AL3+对酶均具有激活作用,而Ag+、Zn2+、Gu2+对酶促反应具有强烈的抑制作用,酶活性基本丧失,在化合物EDTA、DTT中活性明显提高,SDS使酶完全丧失活性;反应的最适底物是乙醛和NAD+,乙醛和NAD+/L,/mg。【结论】研究为重组乙醛脱氢酶纯酶的纯化、得到稳定性好、活性高的酶反应体系及利用该酶进行催化反应和工业化应用提供了重要参数。关键词:乙醛脱氢酶;纯化;binantALDHStudentmajoringinNationalLifeScienceandTechniqueTalentTrainingBase JieXuTutorZhaoxinLuAbstract:[Objective](DE3)/pET32a-istALDH.[Methods]-.[Results]ThemolecularweightofaldehydedehydrogenasemeasuredbySDS-℃,+、Li+andAL3+couldactivetheenzymeactivity,whileAg+、Zn2+andGu2++/L,respectivelyandVm