文档介绍：食用菌的实验————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期: 实验一母种培养基的制作一、本次实验的目的和要求学会母种培养基的配制方法,了解食用菌母种制作的工艺流程和制作母种的基本技能。二、实验内容或原理母种培养基配制。工艺流程:培养基配方培养基的配制分装试管理灭菌摆斜面三、需用的仪器或试剂等仪器:接种箱或超净工作台、高压灭菌锅、电炉、天平、试管、试管架、漏斗、漏斗架、橡皮管、玻璃管。试剂:、马铃薯、葡萄糖、琼脂等。四、,马铃薯(去皮)200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml。为经强化营养或准备保藏菌种,可添加KH2PO43g、、VB110mg。、洗净、挖去芽眼、切成薄片,称取200g,放入铝锅中用1000ml清水加热煮沸,维持20min左右,煮至软而不烂为止。用双层湿沙布过滤,然后取滤液并补足蒸发损失的水分。再加入琼脂继续加热泪,待琼脂溶化后,添加葡萄糖及其它成分,搅拌均匀后准备装管。。装管时勿使管内外壁沾上溶液,以免浸湿棉塞,污染杂菌。装管后塞上棉塞。棉塞的大小、松紧度应适宜,以用手提棉塞、试管不脱落为准。然后每10支度试管扎成一捆,棉塞上方用牛皮纸包好,避免灭菌时被水蒸汽浸湿。。将试管放入锅内,盖上锅盖,对角旋紧锅上螺旋,并闭排气阀,开始加热,当锅内蒸汽大量排出时再继续排汽3-5min,关闭放气阀。(灭菌所需压强)开始计时,继续维持该压强30min。灭菌结束持压力表指针自然回到”0”位时打开放汽阀,排出锅内剩余蒸汽后,打开锅盖。注意切忌在压力表未到”0”位时就放汽,以免试管内的培养基向上冲浸湿棉塞,造成以后菌种的污染。5、摆斜面当培养基的温度降到60℃时,将试管斜面放在木棒上,使呈斜面,斜面的长度以占试管长度的1/2为宜。冷却后即成斜面培养基。五、教学方式以分组的形式进行实验、讨论六、考核要求掌握母种培养基的配制比例与高压灭菌方法。根据提交的实验报告、实验过程与结果,评分方式为优、良、中、及格、不及格。七、实验的报告要求要求有观察记载数据,完成实验报告与作业。实验二菌种的分离与培养一、本次实验的目的和要求掌握母种转管继代培养技术,了解食用菌制作母种的基本技能。二、实验内容或原理本实验以组织分离为例进行菌种分离与培养,工艺流程:种菇的选择与消毒组织块的切取菌丝培养三、需用的仪器或试剂等仪器:接种箱或超净工作台、解剖刀、牛角勺、棉花、纱布、酒精灯等。试剂:75%酒精、高锰酸钾、富尔马林等。四、实验步骤菌种的分离与培养(本实验以组织分离为例)种菇的选择与消毒选择出菇早,菇形正,菇盖肥厚,具有该品种特征,无病虫害、无杂菌污染,子实体八九分成熟的作为种菇。种菇选定后,用75%酒精进行表面消毒。组织块的切取将斜面培养基放进接种室、接种箱或超净工作台内,用紫外灯(或化学药品),关闭紫外灯后20min后,再开始进入接种室内进行接种。接种是一项技术性很强的工作,需要在无菌的环境中以无菌操作方法进行接种,才能减少污染。无菌操作是接种过程中最基本的操作方法,要求操作熟练,动作迅速。用无菌刀在菇柄或菇盖中部纵切一刀,然后用手将菇体掰成两面三刀半,-,将其移接到试管内培养基的中央,将其移接到试管内培养基的中央。菌丝培养接种后置于25℃恒温箱中培养,2-3天后可见组织块周围发生白色绒毛状菌丝,此时每天要检查杂菌污染情况。培养7-10天后,菌丝即可长满斜面。观察记载详细观察比较母种菌丝生长发育动态,计算出平均每天菌丝生长速度。菌落的直径(mm)-菌种块直径(mm)试管内菌丝生长的速度=菌落生长的时间(d)观察母种菌丝的表面形态特征。通过镜检,观察菌丝细胞核的变化规律及锁状联合的形成。五、教学方式以分组的形式进行实验、讨论六、考核要求要求组织分离成功率在50%以上。根据提交的实验报告、实验过程与结果,评分方式为优、良、中、及格、不及格。七、实验的报告要求要求有观察记载数据,完成实验报告。实验三原种与栽培种制作一、本次实验的目的和要求学会原种与栽培种培养基的配制方法,掌握原种与栽培种的接种技术,了解食用菌原种与栽培种制作的工艺流程和制作的基本技能。二、:培养基配料→装瓶(或装袋)→灭菌→冷却→→器械消毒→无菌接种→菌丝培养三、需用的仪器或试剂等仪器:接种箱、高压灭菌锅、750毫升广口