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菌种鉴定标准操作规程.doc

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菌种鉴定标准操作规程.doc

上传人:xnzct26 2020/8/18 文件大小:62 KB

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文档介绍

文档介绍:菌种鉴定标准操作规程目的:建立菌种鉴定标准操作规程围:适用于******鉴定标准操作职责:容:、分离待鉴定菌用接种环挑取待鉴定菌落或少许含菌溶液到相应的培养基上(如TSA),划线分离,以出现微生物单菌落为止。,进行革兰染色、镜检,以确定待鉴定菌的革兰属性。,则先进行发酵实验。如发酵实验结果为阴性,则选用API20NE试剂条进行鉴定;如发酵实验结果为阳性,则在经过细胞色素氧化酶实验后选用API20E试剂条进行鉴定。,则先进行过氧化氢酶实验。如实验结果为阴性则选用APIStrep试剂条进行鉴定,如实验结果为阳性则选用APIStaph试剂条进行鉴定。,则选用API50CHB试剂条进行鉴定;否则,根据运动性实验和过氧化氢酶实验结果选用APICoryne或其他试剂条进行鉴定。,根据不同的API试剂条的标准操作规程准备接种物,进行接种、培养等操作并将结果形成数码,用API鉴定软件鉴定或查询待检菌的名称均可。鉴定结果应记录,必要时,给出相应解释。:甲液:%的酒精20ml乙液:***80ml将甲液和乙液混合均匀,静置48h使用,置密闭棕色瓶中储存。:***300ml配制时先用3~5ml水将碘化钾溶解,再加入碘,用力摇匀,使之全部溶解后,再加水稀释至300ml,摇匀,分装在棕色瓶中储存。:%,然后加入石碳酸溶液,使用时加水稀释至100ml,摇匀。::用接种环挑取液体培养物中菌体在载玻片上涂成薄层,固体培养物则先在载玻片上滴一滴蒸馏水或生理盐水,用接种环挑取少量菌体在载玻片上涂成薄层。:涂片自然干燥或在酒精灯火焰上方微热烘干,并在火焰上通过2~3次,以固定涂片。:在已固定的标本上滴加结晶紫溶液数滴,使染色液覆盖整个涂片标本,染色1分钟。:斜置玻片使很细水流的纯化水从染色标本的上端流下,勿使水流直接冲刷涂片处,直至洗下的水呈无色为止。,用纯化水冲去碘液吸干。%的乙醇脱色约20~30秒,脱色时应将玻片微振动,使酒精分布均匀,立即用水冲净。,用水洗净晾干或吸干。:先用低倍镜观察,找到适合的位置,再加一滴香柏油于涂片上,使用100倍物镜观察细菌革兰氏属性。革兰氏阳性菌染色成蓝紫色,革兰氏阴性菌染成红色,同时做阳性对照。。::用接种环挑取液体培养物中菌体在载玻片上涂成薄层,固体培养物则先在载玻片上滴一滴蒸馏水或生理盐水,用接种环挑取少量菌体在载玻片上涂成薄层。:涂片自然干燥或在酒精灯火焰上方微热烘干,并在火焰上通过2~3次,以固定涂片。:在已固定的标本上滴加结晶紫溶液数滴,使染色液覆盖整个涂片标本,染色1分钟。:斜置