文档介绍：临床与实验病理学杂志; ( ) · ·

石蜡包埋组织检测中提取方法的比较及改进
朱丽华,李琳,章广玲,周天戟
关键词:石蜡包埋组织; 提取; , 后,置冰上, 离心, ,
[ ,]
中图分类号: 文献标识码: ,上清用作的模板。( )标本经切片,常规脱蜡
文章编号: ( ) 后,以蒸馏水作为组织裂解液,煮沸, , 离
[ ]
心, , ,上清液用于反应。( )同( ),但
采用裂解液( 、[ ]、
目前, 常用于新鲜组织或细胞提取标本中的核酸分
蛋白酶)[ ]。
子的检测,较少用于检测石蜡包埋的陈旧组织中的,其!
主要原因是后者核酸的提取较为困难。针对这种情况,我们检测" 引物:上游
;下游,由华美生物工
在对文献报道的几种石蜡包埋组织提取的方法进行了
程公司合成。
比较的基础上,进行了改进,提高了石蜡包埋组织提取
从石蜡包埋组织标本提取的,进行的
进行的阳性率,现介绍如下。"
检测。每次实验均设立阳性及阴性对照, 系统反应
材料与方法体积为,含、引物、
!
、聚合酶、模板。扩
资料收集年唐山市工人医院( 例)、!
增条件为:( ) ,( ) ,( ) ,
开滦医院( 例)和唐山市卫生学校附属医院( 例)病理
( ) ,( )重复、、步, 个循环,( )
科的胃癌患者手术切除后经石蜡包埋的胃癌组织标本
,( ) 备用。
例。
电泳取! 扩增产物与! 上样缓冲液混合,
提取( )石蜡包埋组织,常规切片! 厚,每份
加入预先制备好的琼脂糖凝胶中,同时设分子量标准参
标本切片,置于管中,经常规脱蜡和下
照。恒压电泳,至溴酚蓝的迁移距离达到左
行入水处理后,灭菌生理盐水,洗遍,去除痕量乙醇,
右,终止电泳,以凝胶成像分析系统记录结果。扩增片段大
蒸馏水快速冲洗一遍,去掉生理盐水。加入裂解液(
小。
, 、、
、、蛋白酶) (视组织量
! ! 结果
多少), , ,每振摇次, 过夜;
种方法对" 的检测结果见图和表。
收稿日期: 修回日期:
讨论
作者单位: 华北煤碳医学院生物科学系,唐山
江苏大学医学技术学院,镇江
石蜡包埋的陈旧组织较难用于检测的原因是,组
作者简介:朱丽华( ),女,硕士,讲师。:( ) ,
织在甲醛固定和石蜡包埋的过程中, 受到损伤,加之存
:
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