文档介绍：鱼生长激素(GH)酶联免疫分析试剂盒说明书鱼生长激素(GH)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:-16Ug/L使用目的:本试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中生长激素(GH)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼生长激素(GH)水平。用纯化的鱼生长激素(GH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入生长激素(GH),再与HRP标记的生长激素(GH)抗体结合,形成抗体■抗原■酶标抗体复合物经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的生长激素(GH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鱼生长激素(GH)浓度。试剂盒组成96T标本要求L标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20°C保存,,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50UI,待测样品孔中先加样品稀释液40Ul,然后再加待测样品10Ul(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37°C温育30分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸僧水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50Ul,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5o显色:每孔先加入显色剂A50Ub再加入显色剂B50Ub轻轻震荡混匀,37°:每孔加终止液50UI,终止反应(此时蓝色立转黄色)。:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式