文档介绍：免疫组化实验报告一、:包理机:KD-BM生物组织包埋机,浙江省金华市科迪仪器设备有限公司;切片机:LEICA2016,德国;水浴锅:SHA-C,江苏金坛市荣华仪器制造有限公司;图像采集:采用OLYMPUSBX-D;数据分析软件:(ics公司;:免疫组化染色试剂盒:Histostain-PlusMousePrimary(-6643,Invitrogen,USA)Histostain-PlusRabbitPrimary(-6743,Invitrogen,USA)试剂A(蓝色液体):封闭用正常山羊血清工作液试剂B(黄色液体):生物素化二抗工作液试剂C(橙色液体):辣根酶标记链霉卵白素工作液DABKit(-2014,Invitrogen,USA)二、,包埋前将组织移入包埋用石蜡杯内。从恒温箱取出置于三角架上,其下点燃酒精灯,以保持石蜡的溶解状态。,将包埋用的镊子在酒精灯上加温(防止镊子粘蜡)后,左手持蜡杯,右手把加温的镊子放在蜡口(直立状)倒蜡时让石蜡沿镊子注入包埋框内。,切面朝下放正置入框底并轻轻压平,以保证不再有气泡。,需注意勿使标签与标本混淆,当蜡块冷至蜡面有一层透明蜡膜时,浸入冷水中迅速使其冷却,否则蜡内常形成结晶。,以保证蜡彻底凝固,立即修切,准备制成切片或储藏备用。:取材和固定:根据客户要求将切取3mm大小的组织块。2:脱水和透明:95%酒精Ⅰ(min)95%酒精Ⅱ(min)80%酒精(min)无水酒精Ⅰ(min)无水酒精Ⅱ(min)二甲苯Ⅰ、Ⅱ(min)<2mm45-6045-6045-6015-302-4mm60-12060-12060-120304-5mm120-240120-240120-2406013:浸蜡和包埋:浸蜡:将透明的组织放入蜡杯(Ⅰ)→蜡杯(Ⅱ)→蜡杯(Ⅲ),一般总的浸蜡时间为2-4小时左右。:4:包埋:1)组织浸入石蜡后,包埋前将组织移入包埋用石蜡杯内。从恒温箱取出置于三角架上,其下点燃酒精灯,以保持石蜡的溶解状态。2)准备好包埋框,将包埋用的镊子在酒精灯上加温(防止镊子粘蜡)后,左手持蜡杯,右手把加温的镊子放在蜡口(直立状)倒蜡时让石蜡沿镊子注入包埋框内。3)迅速镊取组织块放入包埋框石蜡内,切面朝下放正置入框底并轻轻压平,以保证不再有气泡。4)待石蜡表面凝固前将标签贴于其上,需注意勿使标签与标本混淆,当蜡块冷至蜡面有透明蜡膜时,浸入冷水中迅速使其冷却,否则蜡内常形成结晶。5)蜡块完全硬固后除去铜框,以保证蜡彻底凝固,立即修切,准备制成切片或储藏备用。5:切片制作:1).室温过高时,可将修好的蜡块放到冰箱中冷却一定时间。在夏季时可用冰块冷却刀和组织块,减少刀与组织块在过程中产生的热时,使石蜡保持合适的硬度以利于切片。