文档介绍：脂质体2000描述脂质体2000是专门用于将核酸转染进入真核细胞的一种形式,我们提供下列的建议:在多种细胞和培养板中都有很高的转染效率。在网上列出的细胞类型中都获得了较高的转染效率。核酸-脂质体2000的复合物可以直接加入到细胞培养液中,无论是有血清还是无血清的情况。转染之后不用移除复合物或者更换培养液,但是复合物应在转染后4-6h移除。转染的一些重要指导DNA转染使用page3我们建议使用Opti-MEMIreducedserum培养基来稀释脂质体2000和核酸。转染时不要向培养基中加入抗生素。在实验过程中要保持一样的条件DNA转染使用下列方法在24孔板内转染DNA进入哺乳动物细胞。对于其他的板子,。准备复合物使DNA(ug):脂质体(ul)的比例为1:2到1:3。转染时细胞密度较高可以获得高的效率,高的表达水平,以及使毒性降低。条件的选择很重要。贴壁细胞:在转染前一天,-2*105个细胞,使得细胞在转染时融合率达到90-95%。切记使用不含抗生素的培养基。对于每一个转染样品,按照如下方法准备复合物:使用无血清的培养基将DNA稀释为50ul,温和混匀。使用前混匀脂质体2000,然后用培养基将一定量的脂质体2000稀释为50ul。室温孵育5min。,混合稀释的DNA和稀释的脂质体2000(总体积为100ul)。温和混匀,室温孵育20min(溶液呈现云雾状)。混合物在室温可稳定存在6h。向含有细胞和培养液的板子中每孔加入100ul的复合物,通过敲打板子和来回晃动使其混合均匀。细胞孵育18-48h后可检测转染情况。培养液可在转染4-6h后更换。对稳定的细胞系:传代细