文档介绍：拟松材线虫Bm-msp-mag1基因原核表达分析研究进展摘要:松材线虫(Bursaphelenchusxylophilus)是我国一种重要的林业外来有害生物,而拟松材线虫()被认为是我国广泛分布的本土种,松材线虫与拟松材线虫的比较研究也就成为探讨松材线虫入侵生物学的重要途径之一。本文综述了与繁殖力密切相关的主要精子蛋白(majorspermprotein,MSP)研究进展,包括MSP的发现,作用机理,及其调控表达;并且阐述了拟松材线虫的研究现状。本研究希望在前期获得拟松材线虫主要精子蛋白Bm-msp-mag1cDNA的基础上,进一步揭示该基因在基因组中的结构特征,并进行相关的生物信息学分析,以期为开展拟松材线虫的致病力、繁殖力等相关的分子机制奠定基础。关键词:拟松材线虫;MSP;基因克隆分析松材线虫与拟松材线虫研究概况松材线虫(Bursaphelenchusxylophilus)是我国一种重要的林业外来有害生物,对我国松林资源和自然景观资源造成严重破坏。而拟松材线虫()被认为是我国广泛分布的本土种。松材线虫与拟松材线虫的比较研究也就成为探讨松材线虫入侵生物学的重要途径之一。以往的比较研究都认为拟松材线虫不具有致病性或致病性较弱[1]。然而近年来,有学者发现部分拟松材线虫虫株也表现出致病性,有的虫株甚至表现出与强毒力松材线虫虫株相似的致病性,但尚未有大规模爆发成灾的报道[2]。除致病力以外,繁殖力也是二者比较研究的重要方面,以往的研究表明植物线虫的致病力与其繁殖力密切的相关,而主要精子蛋白MSP基因克隆与分析是研究其繁殖力的基础性工作,也是揭示其繁殖力等表观性状的重要基础[3],对开展拟松材线虫潜在的威胁性及其可能的扩散蔓延方式的研究具有重要意义。线虫MSP国内外研究概况主要精子蛋白MSP,是取代肌动蛋白而存在于线虫精子中的一种物质[4]。与哺乳动物精子的鞭毛运动不同,线虫精子的运动行为与以肌动蛋白(actin)为基础的阿米巴运动相似。但是,在线虫精子中没有肌动蛋白,取而代之的是以精子主要蛋白装配的胞质骨架驱动的细胞运动。相比其他阿米巴样运动细胞,结构简单、高度特化的线虫精子更有助于研究阿米巴样细胞运动的基本机制,是研究以MSP为基础的细胞运动的理想材料。通过电子显微技术,生物化学和细胞生物学方法,我们研究线虫精子MSP胞质骨架的装配模式,并揭示调控MSP胞质骨架动态变化的信号通路[5]。MSP不仅是线虫精子伪足骨架网络的装配分子,而且还作为信号分子实现精子对卵子的信号通讯,促进卵细胞成熟和排卵。人类MSP的同源蛋白VAPB同样具有信号分子的功能。VAPB突变可引起神经退行性疾病——肌萎缩性侧索硬化(amyotropiclateralsclerosis,ALS)。MSP及含MSP结构域的信号分子在线虫、哺乳动物中的生物学功能,也是我们的研究重点[6]。MSP是线虫体内的一种主要精子蛋白。线虫精子爬行的运动要求与胞体回缩领先优势突出,这两者都是由一个细胞骨架调节供电的基础上主要精子蛋白(MSP)的细丝协调。精子蛋白质电泳表明主要的蛋白质带分子量约15kDa,是专门由一个反中型多克隆对线虫的MSP(伯克和Ward1983)开发的抗体所识别。免疫细胞化学观察表明,肌动蛋白和MSP在雄性生殖细胞的精确定位领域相同