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杀菌率试验规程.docx

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杀菌率试验规程.docx

文档介绍

文档介绍:Q/KMZJ—2008液体洗涤剂杀菌试验规程(内部使用)2008年月日内部执行质量管理中心实验室引用标准1、 GB15979-2002一次性使用卫生用品卫生标准2、 QB/T2738-2005日化产品抗菌抑菌效果的评价方法3、 QB/T2850-2007抗菌抑菌型洗涤剂4、 2002年版《消毒技术规范》(中华人民共和国卫生部)5、 2001年版《药品微生物学检验手册》(科技出版社)杀菌率试验规程1、试验菌、试验温度、作用时间、试液浓度试验菌种:金黄色葡萄球菌(653)8,大肠杆菌(2592)2,白色念珠菌。试验温度:20C±1°C。作用时间:最短不得小于30s。常规作用时间为2min、5min、10min、20min。试液浓度:中和剂鉴定用试液浓度应为正式杀菌试验最高浓度。菌悬液用量:正式杀菌试验用菌悬液的浓度、取量应与中和剂鉴定中1组、2组所用菌悬液的浓度、取量相同。2、 细菌繁殖体悬液、菌片的制备程序 :菌悬液的制备37C培养18h〜24h。用接种环取第 1⑴取冻干菌种管,在无菌操作下,以毛细吸管加入适量营养肉汤,轻柔吸吹数次,使菌种融化分散。-,滴入少许菌种悬液,置代培养的菌悬液,划线于营养琼脂培养基平板上,于37C培养18h〜24h。挑取上述第 2代培养物中典型菌落,接种于营养琼脂斜面,于 37C培养18h〜24h,即为第3代培养物(放在4C左右冰箱中保藏每隔2-3个月移种一次,继续保藏。)。18h〜24h培养),⑵取第3代〜14代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物(经37C培养18h〜24h(或适宜时间)。作为原菌液。(源于《-,反复吹吸,洗下菌苔。随后,,在手掌上振敲80次(力度适中,勿溅出),以使细菌悬液均匀。或从新鲜菌种斜面沾取少量菌苔,接种在适合试验菌生长的培养基中,品微生物学检验手册》211页)⑶细菌繁殖体悬液应保存在 4C冰箱备用。尽量减少在室温下放置时间,以减少细菌的自然死亡。 应当天使用不得过夜。4 4回收菌数为1X10〜9X10 cfu/ml用PBS液配置 GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》回收菌数为1X108—5X108cfu/ml用TSB营养肉汤配置一2002《消毒技术规范》、菌片的制备程序:《消毒技术规范》⑴取冻干菌种管,在无菌操作下,以毛细吸管加入适量营养肉汤,轻柔吸吹数次,使菌种融化分散。-,滴入少许菌种悬液,置 37C培养18h〜24h。用接种环取第 1代培养的菌悬液,划线于营养琼脂培养基平板上,于 37C培养18h〜24h。挑取上述第 2代培养物中典型菌落,接种于营养琼脂斜面,于 37C培养18h〜24h,即为第3代培养物。⑵取第3代〜14代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物(经 18h〜24h培养),-,反复吹吸,洗下菌苔。随后,,在手掌上振敲80次,以使细菌悬液均匀,含菌量 1X108—5xi08cfu/ml。⑶用无菌镊子夹住已灭菌10mm*10mm纸一角,一面朝上,注入10ul菌悬液,放到无菌平板内,37C温箱中干燥20min-30min,(或在室温自然阴干后使用)制成菌片。每个菌片回收菌落,按活菌培养计数所得结果,应为5X105—5X106cfu/片。)⑷细菌繁殖体悬液和菌片,用毕应随时保存在 4C冰箱内。尽量减少在室温下放置时间,以减少细菌的自然死亡。(应当天使用不得过夜。)3、操作程序、悬液定量法杀菌试验操作程序⑴、样品用无菌标准硬水稀释至同中和剂鉴定用试液浓度,或低于中和剂鉴定用试液浓度,制成(稀释 液)试验样液。⑵、将试管按需要数量分别排列于试管架上,各组由左向右,排序、标记。4 4⑶、配制菌悬液,浓度为1X10〜9X10cfu/ml —GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》或188X10—5X10cfu/ml —2002《消毒技术规范》⑷、取杀菌试验用无菌大试管,,,混匀,置20±C5min,,立即开启计时器, 并迅速混匀(在手掌上振摇 80次)。-见《消毒技术规范》或吸取试验用菌悬液 ,加入到含5ml样液的试管中,立即开启计时器,并迅速混匀(在手掌上振摇80次)。-见QB/T2738-2005⑸、作用2min、5min、10min、20min,(中和剂的浓度与容量