文档介绍：重庆大学
硕士学位论文
血清白蛋白与小分子相互作用的荧光光谱法研究
姓名:黄锐
申请学位级别:硕士
专业:药物化学
指导教师:夏之宁
20070425
要摘分子间的相互作用因其在生命科学、环境科学、临床医学等众多领域的广泛需要和重要作用而受到关注。由于蛋白质在人体内的重要功能和地位,基于蛋白质为受体的分子间相互作用成为近年来相互作用研究的焦点。许多相互作用分析的研究都从血清白蛋白分子入手,因为血清白蛋白是一种内源性荧光大分子,用荧光光谱法可以简便、快速、灵敏、直观地反映出它与其它物质之间的相互作用情况,所以,荧光光谱法成为人们研究血清白蛋白与其它物质相互作用的主要手系统的荧光光谱法研究。主要的内容和结果概括如下:从理论上推断,以血清白蛋白为检测对象的传统荧光光谱法存在方法上的缺陷和不足。传统荧光光谱方法将血清白蛋白大分子中几个色氨酸残基的荧光信号当作了整体分子性质的反映,影响了相互作用信息的真实性和完整性。通过理论上的分析,提出了以具有荧光性质的小分子配体为检测对象的改进荧光光谱法。与传统的方法相比,改进荧光光谱法更能全面真实地反映相互作用针对相互作用研究中的荧光光谱重叠现象,提出了“荧光背景扣除法”。该方法有效解决了相互作用体系中两种物质光谱重叠的问题。拓展了荧光光谱法进行相互作用研究的对象和范围。以十二烷基苯磺酸钠、伯氨喹、苯海索、曲拉通⑽鞑记鳌⑽魈F绽等小分子化合物为配体,采用传统荧光光谱法、改进荧光光谱法以及荧光背景扣除法研究了其与牛血清白蛋白的相互作用。所得结果与本研究在理论上的推断一致,证明了传统方法的不足,证明了改进荧光光谱法和荧光背景扣除法的可靠性。从理论上将适用于荧光光谱法研究的相互作用体系归纳为四种类型体系:丑色氨酸残基的荧光信号可以表达整个蛋白分子的性质及变化,即配体只作用于色氨酸残基或只影响色氨酸残基的微环境,无论以蛋白大分子或配体小分子Iò彼岵谢挠ü庑藕挪荒鼙泶镎龅鞍追肿拥男灾始氨浠磁涮宀唤仅作用于色氨酸残基或只影响色氨酸残基的微环境,用具有荧光的小分子配体可段。论文以牛血清白蛋白为例,对血清白蛋白与其它物质之间的相互作用进行了的信息。为荧光检测对象得到的结合常数无明显差异;重庆大学硕士学位论文中文摘要
以直接获得其被蛋白分子猝灭荧光的谱图和数据;ò彼岵谢挠ü庑藕挪荒鼙泶镎龅鞍追肿拥男灾始氨浠遗涮宓挠光受到蛋白荧光的强烈干扰,采用“荧光背景扣除法”对谱图进行优化后可以获光受到蛋白荧光的强烈干扰,如果采用“荧光背景扣除法”对谱图进行优化后仍然不能获得有效的荧光猝灭谱图,这类体系不适用于采用荧光方法进行研究。关键词:相互作用分析,荧光光谱法,改进研究,背景扣除法,牛血清白蛋白得有效的荧光猝灭谱图;重庆大学硕士学位论文中文摘要Ⅱ
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导师龆仍詈签字日期问年律艵学位论文作者签名:责锐签字日期:筇刁年多月导师签名:乡芝学位论文作者签名:凿锐签字日期:五刁年占月午独创性声明学位论文版权使用授权书不保密。中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得重鏖盍堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本重鏖太堂重废太堂年解密后适用本授权书。本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。保密本学位论文属于胫辉谏鲜鲆桓隼ê拍诖颉”
髀相互作用分析分子生物活性的多样性,是因为其在不同环境下与其它分子的作用形式和作用程度的不同而导致的。因此,分子间相互作用的研究具有重要的科学意义和研究价值。近年来,物质相互作用研究的领域不断扩大,探索不断深入,分子间相互作用研究也日益引起关注,成为一个活跃的研究课题。“相互作用分析”在这些年的研究工作中常常被提及¨’“。相互作用分析,椿竦檬芴逵肱涮寮湎嗷プ饔们昂螅У摹⑽锢化学的、生物学的以及分子生物学性质的变化信息的方法,是表征与测量受体与配体相互影响的一种方法。相互作用分析是从分子层次上研究物质间的相互作用。对入们认识自然界及自然界的各种物质活动提供必要的理论指导。评价受、配体之间的相互作用参数有多种,如结合常数、结合比、结合位点数等,其中,结合常数是表征相互作用强弱最重要的参数之一。分子相互作用