文档介绍：三聚******检测方法检测方法利用酶联免疫吸附测定法用食品及饲料中三聚******的定量测定。检测原理酶联免疫吸附测定法定量测定三聚******残留。利用萃取液通过均质及振荡的方式提取样品中的三聚******进行免疫测定。先将三聚******酶标记物,样品萃取物及标准加入到已经包被有三聚******抗体的微孔中开始反应。在30分钟的孵育过程中,样品萃取物中的三聚******与三聚******酶标记物竞争结合微孔中的三聚******抗体,孵育30分钟后洗掉小孔中所有没有结合的三聚******及三聚******酶标记物。在用去离子水清洗结束后,每孔中加入清澈的底物溶液,结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物质。孵育30分钟后停止此反应,根据各孔颜色深浅进行数据读取。依据标准的颜色得出样品中三聚******的的浓度值。实验所需设备及材料三聚******检测试剂盒(目前常用进口试剂有美国Abraxis公司和美国Beacon公司的)酶标仪一台(配有450nm滤光片)1-5ml可调移液器100--..:-2H2O+-12H2O+9gNaCl,,不要同其它公司的产品混用,不要将不同批次的产品混用。样品稀释或含有杂质很可能对结果的准确性有影响。不要使用过期的产品。使用之前将所有试剂回升至室温,但不要放置超过24小时。三聚******属于有毒性的化学品,请小心处理。停止液是1N盐酸,避免接触皮肤。 样品制备(以美国Beacon试剂为例)湿的宠物食品萃取方法(稀释倍数:100)均质样品至布丁状。称取2g样品加入10mL60%甲醇/水溶液,并剧烈振荡。超声萃取1分钟。漩涡混合1分钟,然后静置5分钟,使样品分层。3000g室温离心5分钟。用玻璃纤维滤纸过滤上清液,并将萃取液收集于一干净试管中。用样品稀释液将滤液20倍稀释(如:+%甲醇/20mMPBS)移取150ul进行分析。注意:用此方法测定了8个添加有15ppm三聚******的猫粮(非要求召回),回收率范围为75%-117%。本方法只可作为样品筛选方法,不可作为最终确认方法。小麦面筋蛋白萃取方法:(稀释倍数:500)。%甲醇/水溶液(1mL1NHCl/100mL60%甲醇/水)。,使样品溶解(确保样品中没有结块)。:10比例。(+%MeOH/20mMPBS)。。,并将萃取液收集于一干净试管中。。注意:如果样品中含有大量的添加物,需要加入更大量的萃取溶液,以保证萃取效率。操作人依据自己的判断力,如果测试结果比较高,需要加入两倍的萃取溶液(),进行二次测定。干的宠物食品萃取方法(稀释倍数:200)。%甲醇/水溶液,并剧烈振荡。。漩涡混合1分钟,然后静置5分