文档介绍：高考生物必记知识点(选修3)①能在宿主细胞中稳定保存并大量复制。②有一个至多个限制性核酸内切酶切割位点,以便与外源基因连接。③具有特殊的标记基因,①作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内;②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。,且DNA连接酶起作用时不需要模板。:①切割目的基因和载体时,最好用同一种限制酶,以产生相同的黏性末端。②在切割含目的基因的DNA分子时,需用限制酶切割两次此DNA分子,产生4个末端。只有这样,目的基因两端都有可连接的黏性末端或平末端。③限制酶切割位点应位于标记基因之外,不能破坏标记基因,以便于进行检测。。:加热至90~95℃DNA解链→冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链→加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。(1)目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。(2)组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因。基因工程中构建基因表达载体需要限制酶来切割以获取目的基因,同时需要相同的限制酶切割载体以获取与目的基因相同的黏性末端或平末端,再通过DNA连接酶连接目的基因和载体。——农杆菌转化法(基因枪法、花粉管通道法)动物细胞——显微注射技术微生物细胞——Ca2+:①目的基因是否进入受体细胞——DNA分子杂交(DNA和DNA之间)②目的基因是否转录出信使RNA——分子杂交技术(DNA和RNA之间)③目的基因是否翻译出蛋白质——抗原-抗体杂交方法个体水平检测——抗虫、抗病的接种实验,以确定是否有抗性以及抗性的程度;基因工程产品与天然产品的活性比较,,对现有蛋白质进行改造,或制造出一种新的蛋白质,以满足人类生产和生活的需求,是延伸出来的第二代基因工程。,并在特定位点上切割DNA,,其具有RNA聚合酶结合位点,能启动转录,,首先将目的基因导入农杆菌Ti质粒的T-DNA中,再利用农杆菌侵染植物细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体DNA上。,目的基因的表达与抗性基因存在与否无关。,但工具酶只有2种。工具酶本质为蛋白质,载体本质为小型DNA分子,但不一定是环状。(经组织培养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物(大肠杆菌、酵母菌等)。一般不用支原体,原因是它营寄生生活;一定不能用哺乳动物成熟红细胞,原因是它无细胞核,不能合成蛋白质。,可以检测转基因植物中目的基因的存在,但不能完成对目的基因表达的检测。;目的基因导入成功后,不抑制细胞原有的代谢途径。,会切出相同的黏性末端,再用DNA连接酶连接后,会出现目的基因-载体连接物、载体-载体连接物、目的基因-目的基因连接物三种连接物,再通过筛选才能够获得目的基因-载体连接物。,基因序列不同,蛋白质可以相同。,首先要知道蛋白质的结构,有氨基酸序列构成的一级结构和折叠组装成的空间结构。,有利于细胞的脱分化产生愈伤组织。当愈伤组织分化出芽和叶时,一定要有光照,:,根据细胞中染色体数目和形态的差异可用来鉴定杂种细胞10精选课件