文档介绍:时珍国医国药年第卷第期..
乙酰胆碱受体/亚基—肽段制作
实验性重症肌无力模型的研究
胡任飞,宋雅芳,刘友章,李良龙,黄晓燕,陈裕果,姬爱冬,张久梅
广州中医药大学,广东广州
摘要:目的研究用乙酰胆碱受体【亚基—肽段制作实验性重症肌无力的动物模型。方法给实验组
鼠皮下注射人工合成的鼠源性乙酰胆碱受体【亚基一肽段,观察接种后大鼠一般情况及体重、评分
变化,应用低频重复电刺激检测电衰减反应,并与对照组鼠比较。结果模型组大鼠在第次强化免疫后逐渐出现肌无
力症状,体重增长缓慢或下降,甚至消瘦,毛发变得暗淡、粗糙甚至脱落,再次加强免疫后上述症状明显加重。临
床评分只评分在级以上,并行检测,只模型鼠中只重复刺激电衰减率% ,而对照组衰减率均
% ,两组比较差异有显著性.。结论皮下注射鼠源性乙酰胆碱受体亚基一肽段可成功制作实验性
自身免疫性重症肌无力大鼠模型。
关键词:重症肌无力; 乙酰胆碱受体; 亚基; 肽段
标识::./.....
中图分类号:. 文献标识码: 文章编号:
重症肌无力,是乙酞胆碱受体抗体方法
—介导的、细胞免疫依赖和补体参与的一种自身免疫. 模型建立本实验造模方法参考等“和许文
性疾病,病变主要累及神经肌肉接头处突触后膜乙酰胆碱受体, 华等的制备方法复制模型。具体方法:首先将—
导致神经肌肉接头处传递功能障碍。、、三者按:.: .的比例充分混匀制成免疫乳
用从电鳗电器官中提取的作为免疫原主动免疫易感剂;首次免疫:取乳剂含—:于造模鼠足
鼠来建立模型,这是经典的造模方法。电鳗的电器官中垫、腹部、背部多点皮下注射,对照组皮下注射等量;首次免
含有丰富的,但不足之处是电鳗难以捕获且提纯过程复杂, 疫后及,将—、、三者按::的比例
代价昂贵,限制了该法的大规模应用。充分混匀制成免疫乳剂后,再取乳剂含—:
本研究采用鼠源性乙酰胆碱受体亚基—肽段作为强化接种,对照组同样注射等量。
免疫原接种大鼠,制作模型,观察大鼠肌无力的变. 模型评估标准
化,为研究重症肌无力的发病机制和治疗提供一种较好的实验动.. 临床评估临床评估:通过测量体重和肌力来评价疾病严
物模型。重性。①实验前及接种后每周次称重。末次免疫周后观察
材料其摄食、姿势及活动情况。②测量肌力对于轻度肌无力者给予
. 动物级周龄的大鼠只,雌性,平均体重疲劳试验即让鼠重复抓握笼顶再测量:采用等
..,在自然环境条件下饲养;由北京维通利华实的分级法予以临床评分;肌力具体分级为:级:没有肯定的肌无
验动物技术有限公司提供,合格证号码:一京—力表现;级:撕咬无力,四肢力量差,在光滑地面上前肢打滑,活
。随机取只作为对照组组,剩余大鼠进行造动减少,且容易疲劳;级,明显无力,在抓握前就出现震颤、低
模,第周末,造模大鼠还剩只,经肌电图检测后,确定成模头、隆背、抓握力弱;级,在抓握前即有严重的肌无力表现、无力
只。再将其随机分为模型组、强的松组、健脾祛湿方高剂量组抓握、濒死状态;级,死亡。动物症状在以上者之间可分别以
相当于成人剂量的倍、健脾祛湿方低剂量组相当于成人.,.,.计分。结果以每个时间点的平均数表示。
剂量的倍,分别为、、、组,每组各只,共组。.. 新斯的明试验用腹腔注射法给予新斯