文档介绍：时珍国医国药年第卷第期..
枸杞多糖对人肝癌细胞一的
抑制作用及凋亡的研究
单铁英,赵如同,杨书良,潘秀兰,张红梅
.河北工程大学,河北邯郸, .河北省邯郸市中心血站
摘要:目的研究枸杞多糖诱导人肝癌细胞一的凋亡作用及其作用机制。方法体外培养的人肝癌细胞一
,细胞经不同剂量枸杞多糖处理后,采用法测定细胞的增殖情况,流式细胞仪分析对一细
胞周期和凋亡的影响,用—技术检测一细胞的表达。结果可明显抑制人肝癌细胞
一的生长,并能诱导一细胞凋亡,凋亡率%分别为.±.,.±.和.±.,
与对照组比较,差异有非常显著性.;各剂量药物处理组的肿瘤细胞表达水平均明显降低
.。结论枸杞多糖可抑制一细胞增殖,诱导细胞凋亡,该作用可能与下调细胞表达有关。
关键词:肝癌; 枸杞多糖; 细胞凋亡; 基因表达
标识::......
中图分类号:. 文献标识码: 文章编号:.
枸杞多糖,是枸杞子阳性细胞,即凋亡细胞。随机计数个细胞,算出阳性细胞率。
的提取物,具有多种生物活性作用⋯及抗肿瘤功能,并能诱导.—检测表达细胞分组及处理同方
肿瘤细胞凋亡从而抑制其增殖。然而其诱导人肝癌细胞法“.”,按试剂说明提取细胞总,进行—
一的凋亡及其机制尚未见报道。本文旨在探讨对人扩增,扩增产物经.%琼脂糖凝胶电泳,应用—凝胶分
肝癌细胞~凋亡的影响及其可能机制。析软件对电泳谱带进行分析。引物序列及扩增条件见表。
材料
表及~引物序列及扩增条件
. 药物与试剂人肝癌细胞株一,由北京医科大学科
基因引物序列扩增条件
’
研中心引入,后经我校中心实验室传代。枸杞多糖由本校实验’~

“, 一,. :℃乙
中心从宁夏优质枸杞子中分离提取,纯度超过%.、一
’一一’
及—酶混合物为美国公司产品。四甲基偶一代一,℃
氮唑盐、碘化丙啶、二甲基亚砜及兔抗人
单克隆抗体为美国公司产品,及—. 统计学方法所有的数据均用±表示,采用软件包
引物由上海生物工程技术服务有限公司合成。分析数据,各组间指数的比较采用单因素方差分析。
. 细胞株及其培养人肝癌细胞株一置于结果
培养液中含%胎牛血清和青霉素、链霉素各/,在. 对人肝癌细胞一生长的影响组不同质量浓
℃,饱和湿度,%:培养箱中培养。待细胞进入对数生长度的对体外培养的一细胞均有抑制作用,且呈明显
期后,经.%胰蛋白酶消化,收集,调配成相应的细胞浓度。的剂量一效应关系,最大抑制率达.%。/组与溶
方法剂对照组比较,差异具有显著性.;及/组
. 分组及处理实验设空白对照组、溶剂对照组和个不同质与溶剂对照组比较,差异有显著性.,表。
量浓度实验组,分别为,和。取对数生长
期的一细胞×个/接种于的培养瓶中培表对人肝癌细胞一生长抑制的影响±
养,后加入前述不同质量浓度的,作用后,胰酶消
化离心,将细胞悬浮于磷酸盐缓冲液中,凋质量浓度为×
个/】细胞悬液,备用。
. .对人肝癌细胞株一周期和凋亡的影响取实
验组和对照组细胞样品,/离心,收集细胞, 与对照组比较,., .;
洗涤次,配成×。/细胞悬液,%冷乙醇一固定
. 流式细胞仪检测构杞多糖对一细胞凋亡的影响
。上机测定前,离心去乙醇,用洗