文档介绍：分光光度分析法基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。包括比色法、可见分光光度法紫外分光光度法、红外光谱法等1、基本原理:朗伯-比尔吸收定律当一束平行单色光照射到有色溶液上时,光的一部分将被溶液吸收,一部分透过溶液,还有一部分被器皿的表面反射。在实际测量时,通常将试液和空白溶液分别置于同样质料及厚度的吸收池中,因而反射光强度基本不变(其余条件致),其影响可以不予考虑设入射光的强度为l。,透过光强度为l,溶液浓度为c,液层厚度为b,A=kbcA:吸光度,k为比例常数其中k的值随b、c的单位而变。当c为g/时,k用a表示,称为吸收系数当c为mo时,k用ε表示,称为摩尔吸光系数ε反映吸光物质对光吸收能力,也反映用分光光度法测定该吸光物质的灵敏度,ε越大,方法的灵敏度愈高在多组分系中,如果各种吸光物质之间没有相互作用,这时体系的总吸光度等于各组分吸光度之和,即吸光度具有加和性。A=A1+A2+A3吸光度与透光度的关系:ll。=T2、分光光度计基本部件光源、单光器、吸收池(比色皿)、检测器、显示器3、吸光度测量条件的选择A、波长选择:以最大吸收波长为测量的入射波长—称为最大吸收原则B、吸光度范围的选择:-,T为65-15%;当A=0434(T=368%)时测量的相对误差最小C、参比溶液的选择:进行测量时,利用参比溶液来调节仪器的零点,可以消除由于吸收池壁、溶剂对入射光的反射和吸收带来的误差,并扣除干扰的影响参比溶液可根据下列情况来选择。(1)纯溶剂空白:当试液、试剂及显色剂均无色时,可直接用纯溶剂(或蒸馏水作参比溶液(2)试液空白:显色剂为无色,而被测试液中存在其他有色离子,可用不加显色剂的被测试液作参比溶液(3)试剂空白:试液无色,而试剂或显色剂有颜色时,可选择不加试样溶液的试剂空白作参比溶液(4)显色剂和试液均有颜色,可将一份试液加入适当掩蔽剂,将被测组分掩蔽起来,窭谷晟与逶释勰暑祤丛基宾貍珍扮贇测定方法加入,以此作为(5)改变加入试剂的顺序,使被测组分不发生显色反应,可以此溶液作为参比溶液消除干扰4、标准曲线的制作5、示差法测量高含量组分实验五、水中亚***盐的测定·***·***氮的还原的过程,为测定氨氮和******盐氮的快速测定方法。实验五、水中亚***盐的测定概述亚***盐氮是无机氮化合物之一,是氨氮被氧化和***氮被还原的中间产物,不稳定。通常以其亚***根中的氮原子来计量,用符号NO2N表示。洁净地面水中亚***;海水中亚***~30μg/L。养殖水体中的亚***盐氮对水生动物具有较强的毒性,作用机理主要是通过鱼类等的呼吸作用,亚***盐由鳃丝进入血液,使正常的血红蛋白发生氧化,输氧功能受到影响,出现组织缺氧从而导致鱼虾缺氧,甚至室息死亡。亚***盐还可与仲***类反应生成致癌性的亚硝***类物质。实验五、水中亚***盐的测定方法选择水中亚***盐氮的测定方法通常采用重氮一偶联反应,使生成红紫色染料。所用重氮和偶联试剂种类较多,最常用的一般有对氨基苯磺酸和α—奈***,该法简便,灵敏度高,但盐度对吸光度有影响,而且试剂a—奈***对人体有致癌作用,现今基本不再使用。磺***(对氨基苯磺酰***)和N-(1-萘基)-乙二***盐酸盐(简称萘乙二***)法灵敏度更高,反应速度快试剂较为稳定,而且不受盐度等组分的影响,因此该法是目前国内普遍采用的测定亚***盐氮的方法当将试剂配制成固体粉末时,适合于野外快速测定此外,还有目前国内外普遍使用的离子色谱法和新开发的气相分子吸收法。这两种方法虽然须使用专用仪器,但方法简便、快速,干扰较少。实验五、水中亚***氮的测定磺***和萘乙二***试剂法原理在酸性介质中亚***盐与磺***进行重氮化反应,其产物再与盐酸萘乙***偶合生成红色偶氮染料,在543nm波长处测定吸光度。本方法最低检出浓度(以N计),测定上限为10ymoL主要仪器分光光度计及配套比色皿、25mL具塞比色管等。***溶液(10gL):称取5磺***,溶于360m盐酸溶液(1+6)中,用纯水稀释至500mL,贮于棕色试剂瓶中,有效期为2个月。***溶液(1g/L):***,溶于适量水后定容至500mL,贮于棕色试剂瓶中置冰箱内保存,***盐氮贮备溶液():***钠(NaNO于110℃烘千),溶于少量纯永中后全部转移入500mL容量瓶中,加纯水至标线,***盐氮使用溶液():,用纯水稀释至标线,混匀。临用前配制。实验五、水中亚***氮的测定若水样浑浊,可通过以下方法预先处理