文档介绍：华中科技大学
硕士学位论文
五氯酚降解菌的驯化、筛选及其降解性能的研究
姓名:郭莉明
申请学位级别:硕士
专业:劳动生与环境卫生学
指导教师:王琳
2011-01
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华中科技大学硕士学位论文
五氯酚降解菌的驯化、筛选及其降解性能的研究
硕士研究生:郭莉明
指导老师:王琳副教授
中文摘要
五氯酚(pentachlorophenol,PCP)曾作为木材防腐剂、除草剂、杀菌剂、杀虫剂
等在工农业生产中被广泛应用。因其化学性质稳定、在环境中难以降解,严重威胁自
然环境和人类健康。目前国际癌症研究总局(IARC)已经将其归为“可能的致癌物”。
现有的 PCP 污染处理方式有物理技术、化学技术与生物处理技术。其中,生物处理技
术因其具有投入低、治理效果好以及无二次污染等优点,已逐步被应用到 PCP 污染的
治理工作中。
本研究采用活性污泥曝气与密度梯度驯化方法,以五氯酚为唯一碳源,定时定量
逐步提高 PCP 浓度,经过 8 周驯化分离得到 3 株五氯酚降解菌,分别降解含有等量
PCP 的无机盐溶液,采用高效液相色谱法对它们的降解能力进行检测,其中菌株 A 降
解能力较强,48h 的降解率为 %。对菌株 A 进行生理生化及 16S rDNA 序列分析,
该菌株初步鉴定为施式假单胞菌。菌株 A 的最适生长温度为 30℃,pH 为 ,该菌
在浓度为 3%NaCl 的普通培养基中生长良好,属于耐盐菌。
通过测定不同PCP含量、接种量、温度及pH条件下菌株A对PCP的降解效率,确
定最适降解条件。结果表明,高效降解菌A降解PCP的最适条件是:五氯酚初浓度为
~ g/L,接种量为 2~3ml(108cfu/ml),温度为 30℃、pH为 。
使用碱裂解法对菌株 A 进行质粒提取,琼脂糖凝胶电泳结果显示菌株 A 包含一
大小约 700bp 的质粒。SDS–变温质粒消除实验表明质粒消除后的菌株 A 对 PCP 的耐
受力明显下降,降解率也降低至 %。以 为受体菌做质粒转化试验,对质粒
转化成功的 进行 PCP 降解试验,检测得到其降解率为 %,降解活性略低于
菌株 A。
关键词: 五氯酚生物降解降解菌高效液相色谱降解质粒
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华中科技大学硕士学位论文
Acclimating, screening and degradation characteristics of
pentachlorophenol-degrading bacterium
Master Candidate: Guo Liming
Supervisor: Wang Lin
Abstract
Pentachlorophenol (PCP) has been used extensively as wood preservative, herbicide,
fungicide, pesticides in agricultural and industrial production. It threatens seriously human
health and natural environment due to its physicochemical characteristics. International
agency for research on cancer (IARC) has listed PCP as a potential carcinogen.
At present, physical, chemical and biological treatment methods have been applied in
dealing with PCP. Because biological treatment technology has lower costs and less
pollution, it has aroused general concern to management of PCP.
Activated sludge aeration and method of density gradient were used to acclimate the
sludge. Using pentachlorophenol as a sole carbon source, it was increased step by step in
continuous eight week