文档介绍：时珍国医国药年第卷第期..
本实验所建立方法可以快速检测聿草中总黄酮与木犀草素:.
的含量,并对不同居群薇草中黄酮类化合物含量进行了比较,为周萍,胡碧波,朱倩,.
蓓草资源的深度开发提供了参考。中药材,,:.
陈伟光,盛静,林霞,
参考文献: ,,:.
张凌,张道英,刘亚丽,
:科学出版社,: ,,:.
.
:黑龙江科学技术出版社,
道地药材浙玄参的随机扩增多态性研究
朱振洪,万海同,余勤,刘文洪,韩进
浙江中医药大学生物工程学院,浙江杭州
摘要:目的探讨道地药材浙玄参与非道地药材之间遗传变异大小,并建立道地药材浙玄参的品质鉴定方法。方法运用
随机扩增多态性法对产于浙江、山东、湖北的玄参科植物玄参进行了分子标记研究。结果共筛选出条有
效引物,获得条带,通过聚类分析,构建分子系统树图,确定不同居群间的亲缘关系。结论同种异地药材
所形成的不同居群具有不同的遗传多样性特征。其中浙玄参与山东、湖北玄参存在较大遗传差异,说明浙玄参作为道
地药材,具有自身独特的遗传特征。
关键词:道地药材; 玄参; 随机扩增多态性; 聚类分析
标识::./.....
中图分类号:.; 文献标识码: 文章编号:—
玄参别名元参、黑参、浙玄参,为玄参科植物玄参. 基因组提取方法采用改良法提取基因组,具
.的干燥根,具有滋阴降火、解毒之功效。主体操作如下:取叶片,剪碎后加入适量,一起于液氮中研
产于浙江,另外在山东、湖北、四川、陕西等也有栽培。其中以浙磨成粉。转移粉末到加有提取缓冲液的离心管中,轻轻
江产玄参为道地药材,为著名的“浙八昧”之一。由于该药材品混匀,使粉末充分散开。加入% 溶液,混匀后于
种多、产区广,单纯地依赖形态分类、组织学或化学指纹如高效液℃水浴中保温—间断晃动—次。加人
相色谱、气相色谱等难以区别⋯。现代分子生物,混匀,置冰上~。℃/离心
学研究表明,中药材生物资源的多样性是由于其基因多态性导致。上清液转入新离心管中,加入等体积的氯仿一异戊醇,
的。为从基因角度揭示“道地”药材的生物学本质,本文采用轻轻颠倒混匀。/离心,上清液转入另一
技术分别对来源于浙江、山东、湖北产地的玄参进行遗传离心管中,加入/体积预冷的异丙醇,一℃放置。
多样性研究,旨在为道地药材浙玄参的药材鉴定、栽培繁育、质量/离心,弃上清液,沉淀自然晾干后加入
评价提供依据。缓冲液溶解,并加入/酶,于℃保温。
材料与仪器电泳检测基因组的完整性。
. 供试植物材料分别采于浙江临安、湖北恩施、山东青州等. 引物筛选及方法首先进行随机引物的筛选,核
地。取新鲜健壮嫩叶置液氮罐中,带回实验室一℃冰箱中保苷酸随机引物购自上海生工编号分别为:~,一,
存。~,反应体为: ×.,/
. 提取。试剂提取缓冲液:/—,,./.,引物.,
../ .,/, 模板,聚合酶/. ,补加双蒸
一巯基乙醇。% ,/,/水至。仪的反应条件为:预变性,℃变性
,异丙醇,灭菌水等。.退火,