文档介绍：~ 一
文章编号:———
阴沟肠杆菌的工类整合子检测及相关耐药基因分析
李岩,苏建荣,许淑珍,刘志远
首都医科大学附属北京友谊医院临床检验中心,北京
摘要:目的对临床分离的阴沟肠杆菌进行工类整合子及相关耐药基因分析,探讨类整合子与阴沟肠杆菌耐药
播散的关系。方法使用鉴定细菌;采用扩增技术对株阴沟肠杆菌进行类整合子与耐药
基因型检测;类整合子与耐药基因水平传播采用质粒接合试验;根据指南进行药敏试验。结果株阴沟肠
杆菌中,.%的阴沟肠杆菌携带不同大小的整合子,从整合子中检出的耐药基因盒包括:、;
整合子中检出—、一Ⅱ、基因盒。结论阴沟肠杆菌中常携带含有多种耐药基因的类整合子,类整
合子常参与耐药基因在菌株间进行的水平传递。
关键词:阴沟肠杆菌;类整合子;耐药
中图分类号: 文献标识码:
/,.,
,,., 月却,,
,
: .
.;
..—
.
.% .
,一、,一、,.
.,.
.
:;;
,/,,:
整合子是近年来发现的一种天然的表达和克隆,的阳性参考菌株,阴沟肠杆菌
载体,具有强大的基因捕获、移动和表达能力,目前作为反应的阴性参考菌株。
已有类整合子得到了确定。而在大多数临床分离质粒接合试验菌株供体菌为携带.
株及革兰阴性杆菌中存在着类整合子。本文对临耐药基因的阴沟肠杆菌。受体菌为大
床分离的阴沟肠杆菌携带的工类整合子及相关耐药肠埃希菌一萘啶酸耐药,利福平耐药
基因进行分析,以期探讨工类整合子与耐药基因在,不携带质粒.,不发酵乳糖一。
阴沟肠杆菌菌株问的播散特点与机制。. 抗菌药物与药敏纸片抗菌药物包括,头孢他
材料与方法啶、头孢噻肟、环丙沙星、氨曲南
. 菌株来源、利福平购自中国生物制品研究所。左旋
选取年月至年月问,我院住院氧氟沙星购自北京双鹤药业股份有限公司。
患者痰、尿、伤口引流物等标本中分离的阴沟肠杆菌. 培养基羊血琼脂平板购自天津金章公司。
株。全部菌株均通过—鉴定。—琼脂为英国公司产品。质粒接合试验选
质控菌株大肠埃希菌,铜绿假单择性培养基,参阅文献。
孢菌,肺炎克雷白菌产. 药敏试验琼脂稀释法法,按照
一。经扩增与测序证实的携带有指南进行操作和判读结果。
一、一、—一、—一基因以及工类整. 试剂引物合成,试剂和分子
合子的阴沟肠杆菌,作为聚合酶链反应量标准,均由北京赛百盛公司提供。
中国实验诊断学年月第卷第期———‘——
.耐药基因检测. 整合子扩增产物序列分析
引物设计、反应体系与条件参阅文献。选取不同大小的产物,进行纯化后克隆测
. 类整合子相关耐药基因盒扩增序。其中,约、、大小的
根据工类整合子可变区两侧的高度保守序列设扩增片断测序成功。整合子结构中插入基因
计引物,—.一和—盒为;整合子结构中插入基因盒为
一进行工型整合子可,;整合子结构中插入基因盒为
变区扩增。,一,。
扩增条件:反应体系为,含有× 讨论
反应,,引物各, 细菌耐药性的迅速蔓延及扩散,给临床感染性
聚合酶。整合子扩增条件为:变性’,然后疾病的治疗带来了极大的副作用。在耐药基因扩散
℃’一℃’”一’,个循环,最后的机制中,耐药性质粒及转座子在其中起着重要的
延伸’。作用。近年来