文档介绍：环境中诱变物质微核检测摘要:微核是间期细胞细胞质中一个或多个圆形或杏仁状结构,是染色体发生畸变另一个表现形式,微核发生率用来反应诱变物质对生物遗传危害程度。本试验以大蒜根尖作为试验材料,分别以清水和一定梯度叠氮化钠溶液作为阴性对照和阳性对照,用一定梯度咖啡溶液和电池浸出液对试验组大蒜根尖进行诱变。最终卡诺固定液进行固定、用改良苯酚品红染色、压片后观察统计各组微核千分率,从而了解微核检测方法和意义和经过检测评价环境中常见物质诱变情况。引言微核是间期细胞细胞质中一个或多个圆形或杏仁状结构,是有丝分裂后期丧失着丝粒落后染色体片段形成。微核是染色体畸变一个表现方法。很多能引发染色体断裂理化原因,如辐射、化学诱变剂等,均可作用于分裂细胞而产生微核。现在研究表明,微核发生率同作用因子剂量呈正相关,微核发生率来反应诱变物质对生物遗传危害程度。微核试验是一个建立在细胞水平上分析DNA损伤技术。该技术以其经济、简便、快速、敏感、特异、正确等特点,成为检测致突变剂和环境污染物等经典短期试验方法。现在很多国家和国际组织将其要求为新药、食品添加剂、农药、化妆品等毒理性安全性评价必做试验并用于染色体遗传疾病和癌症前期诊疗等各个方面。本试验采取大蒜作为试验材料,含有很多优点:①用鳞茎进行无性增殖,避免了有性生殖过程中遗传性变异,含有遗传背景稳定优势;②分布广、材料易得,不受地域和季节限制;③培养方便,操作简单,蒜瓣去皮后将基部浸入净水中即可萌生新根,无需其它条件,且蒜瓣体积较小,萌生新根数目较多;④价格低廉,对诱变剂敏感,是一个理想试验材料。多年来,因为大量新化合物合成,原子能应用,多种多样工业废物排出,日常生活中人类接触到有潜在遗传毒性物质越来越多,其中一个较为突出就是废旧电池污染。废旧电池中化学物质不停渗透在环境中,其污染将连续若干年,直接或间接影响大家身体健康,造成很大危害。咖啡关键成份为咖啡因。德国生态学《okeo-test》研究人员发觉,她们所检测全部24种品牌研磨咖啡和7个品牌浓咖啡中全部含有致癌物质——丙烯酰***。检测结果发觉,丙烯酰***也存在于煮熟咖啡中。绝大多数研究均表明咖啡和膀胱癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌等癌症有一定关系。为了研究电池浸出液和电池咖啡是否真正含有诱变致癌作用,此次试验经过用咖啡和电池浸出液进行大蒜诱变培养,在阴性和阳性对照设计下,计算其微核率,经过微核检测技术评价咖啡和电池浸出液诱变情况。:大蒜器材:培养皿、单面刀片、双面刀片、Eppendorf管、油性记号笔、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子;试剂:冰醋酸、无水乙醇、1MHCl溶液、100mmol/LNaN3溶液、电池内部粉末、雀巢速溶咖啡粉末,改良苯酚品红。、大小相对一致大蒜,剥成一瓣瓣后置于放清水培养皿中。于24℃水中浸泡24-36h,选择根长整齐一致,-1cm左右大蒜随机分组。,放入8ml不一样成份培养液中,其中1组为阴性对照组,培养液为清水;2、3组为阳性对照组,培养液分别为25mmol/L、50mmol/LNaN3溶液;5——/。将培养皿中置于20摄氏度左右